เซลล์ HeLa

01Description

02General information

Description

เซลล์ HeLa ซึ่งได้มาจากเซลล์มะเร็งปากมดลูกของเฮนรีเอตตา แล็กส์ เป็นสายพันธุ์เซลล์อมตะที่ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีวการแพทย์ สายพันธุ์เซลล์มนุษย์ Hela ได้มีส่วนสำคัญอย่างยิ่งต่อการก้าวหน้าทางวิจัยที่สำคัญ และยังคงมีบทบาทสำคัญในห้องปฏิบัติการทั่วโลก

ในปี 1951 เฮนรีเอตตา แล็กส์ แม่สาววัยหนุ่มของลูกห้าคน ได้เข้ารับการรักษาที่โรงพยาบาลจอห์นส์ ฮอปกินส์ เนื่องจากมีเลือดออกจากช่องคลอด ที่นั่น ดร.ฮาวเวิร์ด โจนส์ ได้ตรวจพบก้อนเนื้องอกร้ายแรงบนปากมดลูกของเธอ ในตอนนั้น สถาบันการแพทย์จอห์นส์ ฮอปกินส์ เป็นหนึ่งในสถาบันไม่กี่แห่งที่ให้บริการทางการแพทย์แก่ชาวแอฟริกัน-อเมริกันที่ยากจน เฮนรีเอตตา แล็กส์ ได้รับการรักษาด้วยรังสีแรadium สำหรับโรคมะเร็งปากมดลูกของเธอ ซึ่งเป็นการรักษาที่ดีที่สุดในตอนนั้นระหว่างการรักษานั้น มีการทำการตรวจชิ้นเนื้อ และตัวอย่างเซลล์มะเร็งของเธอถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการของ ดร. จอร์จ อ็อตโต เกย์ ดร. เกย์ได้พยายามเพาะเลี้ยงเซลล์จากผู้ป่วยมะเร็งปากมดลูกที่มีภูมิหลังหลากหลาย แต่ไม่ประสบความสำเร็จจนกระทั่งเซลล์ของเฮนรีเอตตา ซึ่งเป็นเซลล์แรกที่สามารถเจริญเติบโตอย่างต่อเนื่องได้ การค้นพบนี้ทำให้เซลล์เหล่านี้แตกต่างจากตัวอย่างทั้งหมดที่เคยมีมาก่อน

มะเร็งปากมดลูกของเฮนรีเอตตา แล็กส์ ถูกค้นพบว่าเกิดจากเชื้อไวรัสฮิวแมนแพปิลโลมาไวรัส (HPV) ต่อมา HPV เป็นไวรัสที่พบได้บ่อยซึ่งสามารถนำไปสู่การเกิดมะเร็งปากมดลูกและโรคอื่น ๆ ได้ การวิจัยเกี่ยวกับเซลล์ HeLa ได้ช่วยให้เข้าใจบทบาทของ HPV ในมะเร็งปากมดลูกอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งนำไปสู่การพัฒนาวัคซีนป้องกัน HPV ที่มีผลกระทบอย่างลึกซึ้งต่อการลดอัตราการเกิดมะเร็งที่เกี่ยวข้องกับ HPV

เซลล์ที่ไม่ธรรมดาเหล่านี้ ซึ่งถูกตั้งชื่อว่า "เซลล์ HeLa" ตามชื่อย่อของเฮนรีเอตตา แล็กส์ ได้กลายเป็นเครื่องมือที่สำคัญอย่างยิ่งในทางการแพทย์ ตั้งแต่นั้นเป็นต้นมา เซลล์เหล่านี้ได้ช่วยให้บรรดานักวิทยาศาสตร์สามารถศึกษาการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็ง ผลกระทบของสารต่าง ๆ และการทำงานของไวรัส ซึ่งมีส่วนช่วยอย่างมากต่อการก้าวหน้าทางการแพทย์ รวมถึงการพัฒนาวัคซีนสำหรับโรคโปลิโอและโควิด-19 โดยไม่ต้องเผชิญกับปัญหาทางจริยธรรมที่เกี่ยวข้องกับการทดลองกับมนุษย์โดยตรง

เซลล์ HeLa ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษาหน้าที่ของยีน การผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ และการบำบัดด้วยยีน เนื่องจากมีประสิทธิภาพในการทรานส์เฟคสูงและมีความไวต่อการติดเชื้อไวรัส เซลล์เหล่านี้มีบทบาทสำคัญในการวิจัยพฤติกรรมของไวรัส รวมถึงการจำลองแบบและพยาธิกำเนิด และมีบทบาทสำคัญในการวิจัยโรคไวรัสตับอักเสบชนิดบี โดยการแสดงโปรตีนของไวรัสและช่วยในการพัฒนาการทดสอบวินิจฉัยและวัคซีน ซึ่งส่งผลให้มาตรการด้านสุขภาพทั่วโลกมีความก้าวหน้าอย่างมีนัยสำคัญ

เซลล์ HeLa ยังคงเป็นทรัพยากรอันล้ำค่าสำหรับการวิจัยทางการแพทย์และวิทยาศาสตร์อย่างต่อเนื่อง ความสำคัญของเซลล์ HeLa และสายพันธุ์เซลล์อมตะอื่น ๆ ไม่สามารถประเมินค่าได้ เนื่องจากพวกมันยังคงมีบทบาทสำคัญในการกำหนดทิศทางของวงการแพทย์และการวิจัยโรคติดเชื้อ อีกทั้งยังเป็นมรดกอันยั่งยืนของเฮนรีเอตตา แล็กส์ และการอุทิศตนของเธอเพื่อความก้าวหน้าทางวิทยาศาสตร์

Tissue

ปากมดลูก

Disease

อะดีโนคาร์ซิโนมา

Applications

โฮสต์สำหรับการถ่ายโอนยีน

Synonyms

• HELA
• Hela
• He La
• He-La
• Henrietta Lacks cells
• Helacyton gartleri

03Classification

Organism

Human

Sex

Female

Growth properties

Adherent

Biosafety level

1

04Characteristics

Morphology

ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว

Karyotype

สายพันธุ์เซลล์ HeLa ซึ่งมีลักษณะทางโครโมโซมที่ซับซ้อน ประกอบด้วยภาวะโครโมโซมผิดปกติจำนวนมากและการจัดเรียงโครงสร้างใหม่ เป็นที่รู้จักกันดีในเรื่องการเจริญเติบโตอย่างรวดเร็วและอายุยืนยาวในการเพาะเลี้ยงเซลล์ HeLa มักแสดงโครโมโซม 82 ตัว แม้ว่าช่วงอาจแตกต่างกันตั้งแต่ 70 ถึง 164 ตัว ที่น่าสังเกตคือ 98% ของเซลล์ HeLa มีโครโมโซมเทเลเซนทริกขนาดเล็ก และ 100% แสดงภาวะโครโมโซมผิดปกติในจำนวนเซลล์ที่ตรวจสอบอย่างมีนัยสำคัญ ความผิดปกติของโครโมโซมเหล่านี้เป็นพื้นฐานของการเจริญเติบโตอย่างรวดเร็วและความเป็นอมตะของเซลล์ รวมถึงความเกี่ยวข้องกับมะเร็งปากมดลูกและเซลล์มะเร็งชนิดอื่นๆ

Doubling time

28 ถึง 36 ชั่วโมง

05Identifiers

Citation

HeLa (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300194)

NCBI TaxID

9606

Cellosaurus

CVCL_0030

06Expression and susceptibility

Isoenzymes

จี6พีดี, เอ

Virus susceptibility

อะดีโนไวรัสชนิดที่ 3 ในมนุษย์, ไวรัสเอนเซฟาโลไมโอคาร์ไดติส, โปลิโอไวรัสชนิดที่ 1 ในมนุษย์, โปลิโอไวรัสชนิดที่ 2 ในมนุษย์, โปลิโอไวรัสชนิดที่ 3 ในมนุษย์

Reverse transcriptase

เชิงลบ

Products

เคราติน, ไลโซฟอสฟาติดิลโคลีน (ไลโซ-พีซี) กระตุ้นกิจกรรมของ AP-1 และกิจกรรมของเอนไซม์ซี-จุน เอ็น-เทอร์มินัล ไคเนส (JNK1) ผ่านเส้นทางที่ไม่เกี่ยวข้องกับโปรตีนไคเนส ซี

07Handling and culture

Culture medium

EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)

Incubation atmosphere

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements

เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%

Dissociation reagent

แอคคูเทส

Subculturing

นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว

Seeding density

1 x 10^{^4} เซลล์/ซม.^²

Fluid renewal

2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์

Post-thaw recovery

หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ลงจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 2 ถึง 3 x 10^{4 เซ}ลล์ต่อ^{ตารางเซนติเมตร} และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ถึง 48 ชั่วโมง

Thawing and culturing

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium

ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง

Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

09Donor

Donor age

30 ปี

Ethnicity

แอฟริกันอเมริกัน

10Legal and safety

Safety precautions

เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้

Warranty

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.

Material Transfer Agreement required

Yes