תאי HeLa

01Description

02General information

Description

תאי HeLa, שמקורם בתאי סרטן צוואר הרחם של הנרייטה לאקס, הם קו תאים בלתי מתכלים הנמצא בשימוש נרחב במחקר ביו-רפואי. קו התאים האנושיים Hela תרם באופן משמעותי להתקדמות מחקרית חשובה וממשיך למלא תפקיד מרכזי במעבדות ברחבי העולם.

בשנת 1951, הנרייטה לאקס, אם צעירה לחמישה ילדים, פנתה לטיפול רפואי בבית החולים ג'ונס הופקינס בשל דימום בנרתיק, שם זיהה ד"ר הווארד ג'ונס גידול ממאיר משמעותי בצוואר הרחם שלה. באותה תקופה, מכון הרפואה ג'ונס הופקינס היה אחד המוסדות הבודדים שהציעו טיפול רפואי לאפרו-אמריקאים עניים. הנרייטה לאקס עברה טיפול ברדיום לסרטן צוואר הרחם שלה, הטיפול המוביל שהיה זמין באותה תקופה. במהלך הטיפול בוצעה ביופסיה, ודגימה של תאי הסרטן שלה נשלחה למעבדתו של ד"ר ג'ורג' אוטו גיי. ד"ר גיי ניסה לגדל תאים מחולות סרטן צוואר הרחם ממגוון רקעים, אך ללא הצלחה, עד שתאי הנרייטה היו התאים הראשונים שהתרבו ברציפות, תגלית שהבדילה אותם מכל הדגימות הקודמות.

מאוחר יותר התגלה כי סרטן צוואר הרחם של הנרייטה לאקס נגרם על ידי נגיף הפפילומה האנושי (HPV). HPV הוא נגיף נפוץ שיכול לגרום לסרטן צוואר הרחם, בין מחלות אחרות. המחקר על תאי HeLa תרם באופן משמעותי להבנת תפקידו של HPV בסרטן צוואר הרחם, והוביל לפיתוח חיסונים מונעים נגד HPV, שהשפיעו עמוקות על הפחתת השכיחות של סוגי סרטן הקשורים ל-HPV.

תאים יוצאי דופן אלה, המכונים "תאי HeLa" על שם ראשי התיבות של הנרייטה לאקס, הפכו מאז לכלי חשוב במחקר הרפואי. הם אפשרו למדענים לחקור את צמיחת תאי הסרטן, את השפעתן של חומרים שונים ואת פעולתן של נגיפים, ותרמו באופן משמעותי להתקדמות הרפואה, כולל פיתוח חיסונים נגד פוליו ו-COVID-19, ללא החששות האתיים הכרוכים בניסויים ישירים בבני אדם.

תאי HeLa נמצאים בשימוש נרחב במחקרים על תפקוד גנים, בייצור חלבונים רקומביננטיים ובטיפול גנטי, בשל יעילותם הגבוהה בהעברת גנים ורגישותם לזיהומים נגיפיים. הם חיוניים במחקר על התנהגות נגיפית, כולל שכפול ופתוגנזה, ומילאו תפקיד מרכזי במחקר על הפטיטיס B באמצעות ביטוי חלבונים נגיפיים וסיוע בפיתוח בדיקות אבחון וחיסונים, ובכך קידמו באופן משמעותי את אמצעי הבריאות העולמיים.

תאי HeLa ממשיכים להיות משאב יקר ערך למחקר מתמשך ברפואה ובמדע. לא ניתן להפריז בחשיבותם של תאי HeLa וקווי תאים בלתי מוות אחרים, שכן הם ממשיכים לעצב את תחום הרפואה ומחקר מחלות זיהומיות, והם מייצגים מורשת מתמשכת של הנרייטה לאקס ותרומתה לקידום המדע.

Tissue

צוואר הרחם

Disease

אדנוקרצינומה

Applications

מארח טרנספקציה

Synonyms

• HELA
• Hela
• He La
• He-La
• Henrietta Lacks cells
• Helacyton gartleri

03Classification

Organism

Human

Sex

Female

Growth properties

Adherent

Biosafety level

1

04Characteristics

Morphology

דמוי אפיתל

Karyotype

קו התאים HeLa, עם הקריוטיפ המורכב שלו המאופיין ברמה גבוהה של אנאופלואידיות ושינויים מבניים, ידוע בצמיחתו המהירה ובאריכות ימיו בתרבית. תאי HeLa מציגים בדרך כלל 82 כרומוזומים, אם כי הטווח יכול לנוע בין 70 ל-164. ראוי לציין ש-98% מתאי HeLa בעלי כרומוזום טלוצנטרי קטן, ו-100% מציגים אנאופלואידיות במספר משמעותי של תאים שנבדקו. חריגות כרומוזומליות אלה מהוות את הבסיס לצמיחתם המהירה ולחיי הנצח שלהם, יחד עם הקשר שלהם לסרטן צוואר הרחם ולתאים סרטניים אחרים.

Doubling time

28 עד 36 שעות

05Identifiers

Citation

HeLa (מספר קטלוגי Cytion 300194)

NCBI TaxID

9606

Cellosaurus

CVCL_0030

06Expression and susceptibility

Isoenzymes

G6PD, A

Virus susceptibility

אדנו-וירוס אנושי 3, נגיף אנצפלומיוקרדיטיס, נגיף פוליו אנושי 1, נגיף פוליו אנושי 2, נגיף פוליו אנושי 3

Reverse transcriptase

שלילי

Products

קרטין, ליזופוספטידילכולין (lyso-PC) מעורר פעילות AP-1 ופעילות c-jun N-terminal kinase (JNK1) באמצעות מסלול שאינו תלוי בחלבון קינאז C

07Handling and culture

Culture medium

EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)

Incubation atmosphere

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

Supplements

הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA

Dissociation reagent

אקוטאז

Subculturing

הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.

Seeding density

1 x 10⁴ תאים/סמ^"ר

Fluid renewal

2 עד 3 פעמים בשבוע

Post-thaw recovery

לאחר ההפשרה, צלחו את התאים ב-2 עד 3 x 10⁴ תאים/סמ"^ר והניחו לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 עד 48 שעות לפחות.

Thawing and culturing

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium

כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.

Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

09Donor

Donor age

30 שנה

Ethnicity

אפרו-אמריקאי

10Legal and safety

Safety precautions

כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.

Warranty

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו

Material Transfer Agreement required

Yes