.jpg)
- Tissue
- צוואר הרחם
- Disease
- אדנוקרצינומה של צוואר הרחם הקשורה לנגיף הפפילומה האנושי
- Synonyms
- HeLa-229, HeLa229
Documents
01General information
- Description
קו התאים HeLa 229 הוא נגזרת משובטת של קו התאים HeLa המקורי, שהיה קו התאים האנושיים הראשון שגודל באופן רציף. תאי HeLa נגזרו מתאי סרטן צוואר הרחם שנלקחו מהנרייטה לאקס בשנת 1951. תת-קו HeLa 229 משמש בתחומים שונים של מחקר ביו-רפואי, כולל מחקר סרטן, פיתוח תרופות וטוקסיקולוגיה, בשל צמיחתו החזקה ויכולת ההסתגלות שלו בתנאי מעבדה.
אחת התכונות העיקריות של קו התאים HeLa 229 היא צמיחתו והתפשטותו האגרסיביות, המשקפות את מקורם הסרטני של התאים. תכונה זו הופכת אותו לשימושי במיוחד במחקרים הדורשים תפוקה גבוהה של תאים וצמיחה מהירה, כגון סינון בתפוקה גבוהה לצורך גילוי תרופות. תאי HeLa 229 גם קלים מאוד למניפולציה גנטית, מה שמאפשר לחוקרים להחדיר גנים זרים או מוטציות ספציפיות כדי לחקור את השפעתם על התנהגות התאים ופתולוגיה.
תאי HeLa 229 ממשיכים להיות מודל קריטי בווירולוגיה, מכיוון שהם רגישים למגוון רחב של נגיפים. רגישות זו הופכת אותם לכלי מצוין לחקר מחזורי החיים של נגיפים, אינטראקציות בין נגיפים למאכסנים ויעילותם של תרכובות אנטי-ויראליות. קו התאים גם סייע בקידום ההבנה שלנו של תהליכים תאיים בסיסיים, כגון שכפול DNA, שעתוק ואפופטוזיס.
למרות השימושיות שלהם, השימוש בתאי HeLa, כולל HeLa 229, מעלה שיקולים אתיים בנוגע להסכמה ולמקור קו התאים, שכן התאים הושגו במקור ללא הסכמתה של הנרייטה לאקס או משפחתה. עם זאת, המחקר המתמשך בתאי HeLa ממשיך לתרום באופן משמעותי למדע, בזכות המאפיינים הייחודיים שלהם וחשיבותם ההיסטורית בהתפתחות הביולוגיה התאית המודרנית.
- Tissue
- צוואר הרחם
- Disease
- אדנוקרצינומה של צוואר הרחם הקשורה לנגיף הפפילומה האנושי
- Synonyms
- HeLa-229
- HeLa229
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- אפיתל
- Doubling time
- 26 שעות
04Identifiers
- Citation
- Hela 229 (מספר קטלוג Cytion 305056)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1276
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS, 1% NEAA ו-1.0 mM נתרן פירובט
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Donor age
- 31 שנים
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)

.jpg)