Preskoči na vsebino
Hela 229
Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
Endocervikalni adenokarcinom, povezan s človeškim papilomavirusom
Sinonimi
HeLa-229, HeLa229

Dokumenti

Hela 229

Cell line · Številka izdelka 305056

The HeLa 229 cell line is a clonal derivative of the original HeLa cell line, which was the first human cell line to be continuously cultured. HeLa cells ...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija HeLa 229 je klonski derivat prvotne celične linije HeLa, ki je bila prva človeška celična linija z neprekinjenim gojenjem. Celice HeLa so bile pridobljene iz celic raka materničnega vratu, odvzetih Henrietti Lacks leta 1951. Podlinija HeLa 229 se zaradi močne rasti in prilagodljivosti v laboratorijskih pogojih uporablja na različnih področjih biomedicinskih raziskav, vključno z raziskavami raka, razvojem zdravil in toksikologijo.

Ena od glavnih značilnosti celične linije HeLa 229 je njena agresivna rast in razmnoževanje, kar odraža rakavo poreklo celic. Zaradi tega je še posebej uporabna za študije, ki zahtevajo velik donos celic in hitro rast, kot je na primer visoko zmogljivo presejanje za odkrivanje zdravil. Celice HeLa 229 so tudi zelo dovzetne za gensko manipulacijo, kar raziskovalcem omogoča vnos tujih genov ali posebnih mutacij za preučevanje njihovih učinkov na obnašanje celic in patologijo.

Celice HeLa 229 so še vedno pomemben model v virologiji, saj so dovzetne za najrazličnejše viruse. Zaradi te dovzetnosti so odlično orodje za preučevanje življenjskih ciklov virusov, interakcij med gostiteljem in virusom ter učinkovitosti protivirusnih spojin. Ta celična linija je prav tako prispevala k boljšemu razumevanju temeljnih celičnih procesov, kot so replikacija DNA, transkripcija in apoptoza.

Kljub uporabnosti uporabe celic HeLa, vključno s HeLa 229, se pojavljajo etični pomisleki glede privolitve in izvora celične linije, saj so bile celice prvotno pridobljene brez privolitve Henriette Lacks ali njene družine. Vendar pa raziskave, ki potekajo s celicami HeLa, še naprej pomembno prispevajo k znanosti zaradi njihovih edinstvenih lastnosti in zgodovinskega pomena pri razvoju sodobne celične biologije.

Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
Endocervikalni adenokarcinom, povezan s človeškim papilomavirusom
Sinonimi
  • HeLa-229
  • HeLa229

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Čas podvojitve
26 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
Hela 229 (kataloška številka Cytion 305056)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1276

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 1 % NEAA in 1,0 mM natrijevega piruvata
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
31 let