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Hela 229
Tecido
Colo do útero
Doença
Adenocarcinoma endocervical relacionado com o papilomavírus humano
Sinónimos
HeLa-229, HeLa229

Documentos

Hela 229

Cell line · Número do produto 305056

The HeLa 229 cell line is a clonal derivative of the original HeLa cell line, which was the first human cell line to be continuously cultured. HeLa cells ...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular HeLa 229 é um derivado clonal da linha celular HeLa original, que foi a primeira linha celular humana a ser cultivada continuamente. As células HeLa foram derivadas de células de cancro do colo do útero retiradas de Henrietta Lacks em 1951. A sub-linha HeLa 229 é utilizada em várias áreas da investigação biomédica, incluindo a investigação do cancro, o desenvolvimento de medicamentos e a toxicologia, devido ao seu crescimento robusto e adaptabilidade em condições laboratoriais.

Uma das principais caraterísticas da linha celular HeLa 229 é o seu crescimento e proliferação agressivos, reflectindo a origem cancerígena das células. Este facto torna-a particularmente útil para estudos que exijam um elevado rendimento celular e um crescimento rápido, como o rastreio de alto rendimento para a descoberta de medicamentos. As células HeLa 229 são também altamente susceptíveis de manipulação genética, permitindo aos investigadores introduzir genes estranhos ou mutações específicas para estudar os seus efeitos no comportamento e na patologia das células.

As células HeLa 229 continuam a ser um modelo crítico em virologia, uma vez que são susceptíveis a uma grande variedade de vírus. Esta suscetibilidade torna-as uma excelente ferramenta para estudar os ciclos de vida dos vírus, as interações vírus-hospedeiro e a eficácia dos compostos antivirais. A linha celular também tem sido fundamental para o avanço da nossa compreensão dos processos celulares fundamentais, como a replicação do ADN, a transcrição e a apoptose.

Apesar da sua utilidade, a utilização de células HeLa, incluindo a HeLa 229, levanta considerações éticas relativamente ao consentimento e às origens da linha celular, uma vez que as células foram originalmente obtidas sem o consentimento de Henrietta Lacks ou da sua família. No entanto, a investigação em curso com células HeLa continua a contribuir significativamente para a ciência, devido às suas caraterísticas únicas e à sua importância histórica no desenvolvimento da biologia celular moderna.

Tecido
Colo do útero
Doença
Adenocarcinoma endocervical relacionado com o papilomavírus humano
Sinónimos
  • HeLa-229
  • HeLa229

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tempo de duplicação
26 horas

04Identificadores

Referência
Hela 229 (número de catálogo da Cytion 305056)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1276

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 10% de FBS, 1% de NEAA e 1,0 mM de piruvato de sódio
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
31 anos