Pāriet uz saturu
Hela 229
Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Ar cilvēka papilomas vīrusu saistīta endocervikālā adenokarcinoma
Sinonīmi
HeLa-229, HeLa229

Dokumenti

Hela 229

Cell line · Preces numurs 305056

The HeLa 229 cell line is a clonal derivative of the original HeLa cell line, which was the first human cell line to be continuously cultured. HeLa cells ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HeLa 229 šūnu līnija ir sākotnējās HeLa šūnu līnijas klona atvasinājums, kas bija pirmā nepārtraukti kultivētā cilvēka šūnu līnija. HeLa šūnas tika iegūtas no dzemdes kakla vēža šūnām, kas 1951. gadā tika iegūtas no Henriettas Lacks. HeLa 229 apakšlīniju izmanto dažādās biomedicīnas pētniecības jomās, tostarp vēža pētniecībā, zāļu izstrādē un toksikoloģijā, jo tā ir spēcīga augšanas un pielāgošanās spēja laboratorijas apstākļos.

Viena no galvenajām HeLa 229 šūnu līnijas īpašībām ir tās agresīvā augšana un proliferācija, kas atspoguļo šūnu vēža izcelsmi. Tas padara to īpaši noderīgu pētījumos, kuros nepieciešama liela šūnu ražība un ātra augšana, piemēram, augstas veiktspējas skrīningā zāļu atklāšanai. HeLa 229 šūnas ir arī ļoti viegli pakļautas ģenētiskām manipulācijām, ļaujot pētniekiem ieviest svešus gēnus vai specifiskas mutācijas, lai pētītu to ietekmi uz šūnu uzvedību un patoloģiju.

HeLa 229 šūnas joprojām ir ļoti svarīgs modelis virusoloģijā, jo tās ir uzņēmīgas pret dažādiem vīrusiem. Šī uzņēmība padara tās par lielisku līdzekli vīrusu dzīves ciklu, saimnieka un vīrusa mijiedarbības un pretvīrusu savienojumu efektivitātes izpētei. Šī šūnu līnija ir arī palīdzējusi labāk izprast tādus būtiskus šūnu procesus kā DNS replikācija, transkripcija un apoptoze.

Neraugoties uz HeLa šūnu, tostarp HeLa 229, lietderību, to izmantošana rada ētiskus apsvērumus par piekrišanu un šūnu līnijas izcelsmi, jo šūnas sākotnēji tika iegūtas bez Henriettas Lacks vai viņas ģimenes piekrišanas. Tomēr ar HeLa šūnām veiktie pētījumi turpina sniegt nozīmīgu ieguldījumu zinātnē, ko nosaka to unikālās īpašības un vēsturiskā nozīme mūsdienu šūnu bioloģijas attīstībā.

Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Ar cilvēka papilomas vīrusu saistīta endocervikālā adenokarcinoma
Sinonīmi
  • HeLa-229
  • HeLa229

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
26 stundas

04Identifikatori

Atsauce
Hela 229 (Cytion kataloga numurs 305056)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1276

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS, 1% NEAA un 1,0 mM nātrija piruvāta
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
31 gads