Премини към съдържанието
Hela 229
Тъкан
Цервикс
Заболяване
Свързан с човешкия папиломен вирус ендоцервикален аденокарцином
Синоними
HeLa-229, HeLa229

Документи

Hela 229

Cell line · Номер на продукта 305056

The HeLa 229 cell line is a clonal derivative of the original HeLa cell line, which was the first human cell line to be continuously cultured. HeLa cells ...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия HeLa 229 е клоново производно на оригиналната клетъчна линия HeLa, която е първата човешка клетъчна линия, отглеждана непрекъснато. Клетките HeLa са получени от клетки на рак на маточната шийка, взети от Хенриета Лакс през 1951 г. Подлинията HeLa 229 се използва в различни области на биомедицинските изследвания, включително изследвания на рака, разработване на лекарства и токсикология, поради стабилния си растеж и адаптивност в лабораторни условия.

Една от основните характеристики на клетъчната линия HeLa 229 е нейният агресивен растеж и пролиферация, което отразява раковия произход на клетките. Това я прави особено полезна за изследвания, изискващи висок добив на клетки и бърз растеж, като например високопроизводителен скрининг за откриване на лекарства. Клетките HeLa 229 също така са много податливи на генетични манипулации, което позволява на изследователите да въвеждат чужди гени или специфични мутации, за да изследват тяхното въздействие върху поведението и патологията на клетките.

Клетките HeLa 229 продължават да бъдат важен модел във вирусологията, тъй като са чувствителни към голямо разнообразие от вируси. Тази чувствителност ги превръща в отличен инструмент за изучаване на жизнените цикли на вирусите, взаимодействията между гостоприемника и вирусите и ефикасността на антивирусните съединения. Клетъчната линия също така е допринесла за напредъка в разбирането ни на основните клетъчни процеси, като репликация на ДНК, транскрипция и апоптоза.

Въпреки полезността им, използването на HeLa клетки, включително HeLa 229, поражда етични съображения относно съгласието и произхода на клетъчната линия, тъй като клетките първоначално са получени без съгласието на Хенриета Лакс или нейното семейство. Въпреки това продължаващите изследвания с HeLa клетки продължават да имат значителен принос за науката, обусловен от техните уникални характеристики и историческо значение за развитието на съвременната клетъчна биология.

Тъкан
Цервикс
Заболяване
Свързан с човешкия папиломен вирус ендоцервикален аденокарцином
Синоними
  • HeLa-229
  • HeLa229

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиален
Време за удвояване
26 часа

04Идентификатори

Източник
Hela 229 (каталожен номер на Cytion 305056)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1276

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS, 1% NEAA и 1,0 mM натриев пируват
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
31 години