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Hela 229
Tissue
Col de l'utérus
Disease
Adénocarcinome endocervical lié au virus du papillome humain
Synonyms
HeLa-229, HeLa229

Documents

Hela 229

Cell line · Product number 305056

The HeLa 229 cell line is a clonal derivative of the original HeLa cell line, which was the first human cell line to be continuously cultured. HeLa cells ...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

La lignée cellulaire HeLa 229 est un dérivé clonal de la lignée cellulaire HeLa originale, qui fut la première lignée cellulaire humaine à faire l’objet d’une culture continue. Les cellules HeLa ont été isolées à partir de cellules cancéreuses du col de l’utérus prélevées sur Henrietta Lacks en 1951. La sous-lignée HeLa 229 est utilisée dans divers domaines de la recherche biomédicale, notamment la recherche sur le cancer, le développement de médicaments et la toxicologie, en raison de sa croissance vigoureuse et de sa capacité d’adaptation dans des conditions de laboratoire.

L’une des principales caractéristiques de la lignée cellulaire HeLa 229 est sa croissance et sa prolifération agressives, qui reflètent l’origine cancéreuse des cellules. Cela la rend particulièrement utile pour les études nécessitant des rendements cellulaires élevés et une croissance rapide, comme le criblage à haut débit pour la découverte de médicaments. Les cellules HeLa 229 se prêtent également très bien à la manipulation génétique, ce qui permet aux chercheurs d’y introduire des gènes étrangers ou des mutations spécifiques afin d’étudier leurs effets sur le comportement cellulaire et la pathologie.

Les cellules HeLa 229 demeurent un modèle essentiel en virologie, car elles sont sensibles à une grande variété de virus. Cette sensibilité en fait un excellent outil pour étudier les cycles de vie viraux, les interactions hôte-virus et l’efficacité des composés antiviraux. Cette lignée cellulaire a également joué un rôle déterminant dans l’avancement de notre compréhension des processus cellulaires fondamentaux, tels que la réplication de l’ADN, la transcription et l’apoptose.

Malgré leur utilité, l’utilisation des cellules HeLa, y compris la lignée HeLa 229, soulève des considérations éthiques concernant le consentement et les origines de la lignée cellulaire, car ces cellules ont été initialement prélevées sans le consentement d’Henrietta Lacks ni de sa famille. Toutefois, les recherches en cours sur les cellules HeLa continuent de contribuer de manière significative à la science, grâce à leurs caractéristiques uniques et à leur importance historique dans le développement de la biologie cellulaire moderne.

Tissue
Col de l'utérus
Disease
Adénocarcinome endocervical lié au virus du papillome humain
Synonyms
  • HeLa-229
  • HeLa229

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Épithélial
Doubling time
26 heures

04Identifiers

Citation
Hela 229 (numéro de catalogue Cytion 305056)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1276

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 10 % de FBS, 1 % de NEAA et 1,0 mM de pyruvate de sodium
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donor

Donor age
31 ans