Siirry sisältöön
Hela 229
Kudos
Kohdunkaula
Sairaus
Ihmisen papilloomavirukseen liittyvä kohdunkaulan adenokarsinooma
Synonyymit
HeLa-229, HeLa229

Asiakirjat

Hela 229

Cell line · Tuotenumero 305056

The HeLa 229 cell line is a clonal derivative of the original HeLa cell line, which was the first human cell line to be continuously cultured. HeLa cells ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HeLa 229 -solulinja on kloonijohdannainen alkuperäisestä HeLa-solulinjasta, joka oli ensimmäinen jatkuvasti viljelty ihmisen solulinja. HeLa-solut johdettiin Henrietta Lacksilta vuonna 1951 otetuista kohdunkaulan syöpäsoluista. HeLa 229 -alilinjaa hyödynnetään biolääketieteellisen tutkimuksen eri osa-alueilla, kuten syöpätutkimuksessa, lääkekehityksessä ja toksikologiassa, koska se kasvaa voimakkaasti ja mukautuu laboratorio-olosuhteissa.

Yksi HeLa 229 -solulinjan tärkeimmistä ominaisuuksista on sen aggressiivinen kasvu ja lisääntyminen, mikä kuvastaa solujen syöpäperäisyyttä. Tämän vuoksi se on erityisen hyödyllinen tutkimuksissa, jotka edellyttävät suuria solutuottoja ja nopeaa kasvua, kuten lääkkeiden löytämiseksi tehtävässä korkean läpimenon seulonnassa. HeLa 229 -solut ovat myös hyvin alttiita geneettiselle manipuloinnille, minkä ansiosta tutkijat voivat lisätä niihin vieraita geenejä tai erityisiä mutaatioita tutkiakseen niiden vaikutuksia solujen käyttäytymiseen ja patologiaan.

HeLa 229 -solut ovat edelleen tärkeä malli virologiassa, koska ne ovat alttiita monille erilaisille viruksille. Tämä alttius tekee niistä erinomaisen välineen virusten elinkaaren, isännän ja viruksen vuorovaikutuksen sekä viruslääkkeiden tehokkuuden tutkimiseen. Solulinja on myös edistänyt ymmärrystämme perustavanlaatuisista soluprosesseista, kuten DNA:n replikaatiosta, transkriptiosta ja apoptoosista.

Hyödyllisyydestään huolimatta HeLa-solujen, myös HeLa 229:n, käyttö herättää eettisiä kysymyksiä, jotka liittyvät suostumukseen ja solulinjan alkuperään, sillä solut saatiin alun perin ilman Henrietta Lacksin tai hänen perheensä suostumusta. HeLa-soluilla tehtävä tutkimus edistää kuitenkin edelleen merkittävästi tiedettä, koska ne ovat ainutlaatuisia ja historiallisesti merkittäviä nykyaikaisen solubiologian kehityksessä.

Kudos
Kohdunkaula
Sairaus
Ihmisen papilloomavirukseen liittyvä kohdunkaulan adenokarsinooma
Synonyymit
  • HeLa-229
  • HeLa229

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kaksinkertaistumisaika
26 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
Hela 229 (Cytionin tuotenumero 305056)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1276

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä, 1 % NEAA:lla ja 1,0 mM natriumpyruvaatilla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
31 vuotta