Mine otse sisu juurde
Hela 229
Kude
Emakakael
Haigus
Inimese papilloomiviirusega seotud endokervikaalne adenokartsinoom
Sünonüümid
HeLa-229, HeLa229

Dokumendid

Hela 229

Cell line · Toote number 305056

The HeLa 229 cell line is a clonal derivative of the original HeLa cell line, which was the first human cell line to be continuously cultured. HeLa cells ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HeLa 229 rakuliin on klonaalne derivaat algsest HeLa rakuliinist, mis oli esimene inimese rakuliin, mida kasvatati pidevalt. HeLa rakud on saadud Henrietta Lacksilt 1951. aastal võetud emakakaelavähirakkudest. HeLa 229 alamliini kasutatakse erinevates biomeditsiiniuuringute valdkondades, sealhulgas vähiuuringutes, ravimite väljatöötamisel ja toksikoloogias, tänu selle jõulisele kasvule ja kohanemisvõimele laboritingimustes.

HeLa 229 rakuliini üks peamisi omadusi on selle agressiivne kasv ja proliferatsioon, mis peegeldab rakkude vähkkasvaja päritolu. See muudab selle eriti kasulikuks uuringutes, mis nõuavad suurt rakkude saagikust ja kiiret kasvu, näiteks ravimite avastamiseks tehtavad kõrge läbilaskevõimega sõeluuringud. HeLa 229 rakud on ka väga hästi kohandatavad geneetilisele manipuleerimisele, mis võimaldab teadlastel lisada võõraid geene või spetsiifilisi mutatsioone, et uurida nende mõju rakkude käitumisele ja patoloogiale.

HeLa 229 rakud on jätkuvalt oluline mudel viroloogias, kuna nad on vastuvõtlikud paljudele erinevatele viirustele. Selline vastuvõtlikkus muudab nad suurepäraseks vahendiks viiruste elutsüklite, peremeesviiruse ja viiruse koostoimete ning viirusevastaste ühendite tõhususe uurimiseks. Rakuliin on aidanud kaasa ka meie arusaamadele põhilistest rakuprotsessidest, nagu DNA replikatsioon, transkriptsioon ja apoptoos.

Vaatamata nende kasulikkusele tõstatab HeLa rakkude, sealhulgas HeLa 229 kasutamine eetilisi küsimusi seoses nõusoleku ja rakuliini päritoluga, kuna rakud saadi algselt ilma Henrietta Lacksi või tema perekonna nõusolekuta. Siiski annavad HeLa rakkudega tehtavad teadusuuringud jätkuvalt märkimisväärse panuse teadusesse, mis on tingitud nende unikaalsetest omadustest ja ajaloolisest tähtsusest kaasaegse rakubioloogia arengus.

Kude
Emakakael
Haigus
Inimese papilloomiviirusega seotud endokervikaalne adenokartsinoom
Sünonüümid
  • HeLa-229
  • HeLa229

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Kahekordistumisaeg
26 tundi

04Tunnused

Viide
Hela 229 (Cytioni katalooginumber 305056)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1276

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 1% NEAA ja 1,0 mM naatriumpüruvaadiga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
31 aastat