Mine otse sisu juurde
Hela-Luc
Kude
Emakas, emakakael
Haigus
Inimese papilloomiviirusega seotud endokervikaalne adenokartsinoom

Dokumendid

Hela-Luc

Cell line · Toote number 305664

HeLa-Luc cells are a bioluminescent derivative of the human HeLa cervical adenocarcinoma cell line that have been engineered to constitutively express a l...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HeLa-Luc-rakud on inimese emakakaela adenokartsinoomi rakuliini HeLa bioluminestsentsne derivaat, mis on geneetiliselt muundatud nii, et need ekspresseerivad pidevalt lusiferase-reportergeeni. Pärast lusiferini substraadi manustamist kiirgavad need rakud kvantifitseeritavat luminestsentssignaali, mis on otseselt seotud eluvõimeliste rakkude arvu ja ainevahetusaktiivsusega. See omadus võimaldab tundlikku, mitteinvasiivset jälgimist kasvajarakkude proliferatsiooni, ellujäämise ja leviku osas nii in vitro analüüsides kui ka in vivo pildistamisrakendustes. HeLa-Luc rakud säilitavad vanemate HeLa rakkudega seotud tugevad kasvukarakteristikud ja epiteelimorfoloogia, pakkudes samal ajal täiendavat optilist lugemit pikaajaliseks eksperimentaalseks analüüsiks.

Lusiferaasi ekspresseeriv fenotüüp muudab HeLa-Luc-rakud eriti kasulikuks ksenotransplantaadi- ja metastaasiuuringutes immuunpuudulikkusega loommudelites, kus reaalajas bioluminestsentskuvamist saab kasutada kasvajakoormuse ja ravivastuse jälgimiseks aja jooksul. Rakupõhistes testides kasutatakse neid rakke laialdaselt suure läbilaskevõimega ravimite sõelumisel, tsütotoksilisuse testimisel, geeniedastussüsteemide hindamisel ning vähirakkude signaalimise ja apoptoosi uuringutes. Stabiilne reportergeeni ekspressioon toetab ka reprodutseeritavat kvantifitseerimist ko-kultuuri süsteemides ja eksperimentaalsetes mudelites, mis nõuavad rakkude eluvõimelisuse või transkriptsioonilise aktiivsuse dünaamilist jälgimist.

Nagu vanemate HeLa-rakkude puhul, näitavad ka HeLa-Luc-rakud genoomilist ebastabiilsust ja suurt proliferatiivset võimet, mis on iseloomulikud inimese papilloomiviiruse tüübi 18 (HPV-18)ga seotud transformeeritud emakakaelavähirakkudele. Eksperimentaalsed tingimused, lusiferaasi vektori disain, promootori valik ja valikustrateegia võivad laborite või kommertsallikate vahel erineda, mõjutades potentsiaalselt reportergeeni intensiivsust ja pikaajalist ekspressiooni stabiilsust. Seetõttu peaksid teadlased enne laiaulatuslikku eksperimentaalset kasutamist kontrollima lusiferase aktiivsust, kasvukineetikat ja fenotüübilist järjepidevust oma konkreetsetes kultuuri- ja analüüsitingimustes.

Kude
Emakas, emakakael
Haigus
Inimese papilloomiviirusega seotud endokervikaalne adenokartsinoom

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
Hela-Luc (Cytioni katalooginumber 305664)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_YA88

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)
Isoensüümid
G6PD, A
Viirusele vastuvõtlikkus
Polioviirus 1, 2, 3, vesikulaarstomatiit (Indiana), entsefalomüokardiit, adenoviirus 5
Pöördtranskriptaas
Negatiivne
Tooted
Keratiin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
30,5 aastat
Etniline kuuluvus
Afroameeriklane