Hela-Luc

As células HeLa-Luc são um derivado bioluminescente da linha celular humana HeLa de adenocarcinoma cervical, que foram geneticamente modificadas para expressarem de forma constitutiva um gene repórter de luciferase. Após a administração do substrato luciferina, estas células emitem um sinal luminescente quantificável que se correlaciona diretamente com o número de células viáveis e a atividade metabólica. Esta característica permite a monitorização sensível e não invasiva da proliferação, sobrevivência e disseminação das células tumorais, tanto em ensaios in vitro como em aplicações de imagiologia in vivo. As células HeLa-Luc mantêm as características de crescimento robusto e a morfologia epitelial associadas às células HeLa parentais, ao mesmo tempo que fornecem uma leitura ótica adicional para análise experimental longitudinal.

O fenótipo de expressão de luciferase torna as células HeLa-Luc particularmente úteis para estudos de xenoenxertos e metástases em modelos animais imunocomprometidos, onde a imagiologia por bioluminescência em tempo real pode ser utilizada para acompanhar a carga tumoral e a resposta terapêutica ao longo do tempo. Em ensaios baseados em células, estas células são amplamente utilizadas para o rastreio de fármacos de alto rendimento, testes de citotoxicidade, avaliação de sistemas de entrega de genes e estudos de sinalização e apoptose de células cancerígenas. A expressão estável do repórter também permite uma quantificação reprodutível em sistemas de cocultura e modelos experimentais que requerem monitorização dinâmica da viabilidade celular ou da atividade transcricional.

Tal como acontece com as células HeLa parentais, as células HeLa-Luc apresentam a instabilidade genómica e a elevada capacidade proliferativa características das células de cancro do colo do útero transformadas associadas ao papilomavírus humano tipo 18 (HPV-18). As condições experimentais, o desenho do vetor de luciferase, a seleção do promotor e a estratégia de seleção podem variar entre laboratórios ou fontes comerciais, podendo influenciar a intensidade do repórter e a estabilidade da expressão a longo prazo. Os investigadores devem, portanto, verificar a atividade da luciferase, a cinética de crescimento e a consistência fenotípica nas suas condições específicas de cultura e ensaio antes da utilização experimental em grande escala.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia