Siirry sisältöön
Hela-Luc
Kudos
Kohtu, kohdunkaula
Sairaus
Ihmisen papilloomavirukseen liittyvä kohdunkaulan adenokarsinooma

Asiakirjat

Hela-Luc

Cell line · Tuotenumero 305664

HeLa-Luc cells are a bioluminescent derivative of the human HeLa cervical adenocarcinoma cell line that have been engineered to constitutively express a l...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HeLa-Luc-solut ovat ihmisen HeLa-kohdunkaulan adenokarsinoomasolulinjan bioluminesoiva johdannainen, joka on muokattu ilmentämään jatkuvasti lusiferaasi-ilmaisingeeniä. Lusiferin-substraatin antamisen jälkeen nämä solut lähettävät mitattavissa olevan luminesenssisignaalin, joka korreloi suoraan elävien solujen lukumäärän ja aineenvaihdunnan aktiivisuuden kanssa. Tämä ominaisuus mahdollistaa herkän, ei-invasiivisen seurannan kasvainsolujen lisääntymisestä, eloonjäämisestä ja leviämisestä sekä in vitro -määrityksissä että in vivo -kuvantamissovelluksissa. HeLa-Luc-solut säilyttävät vanhempien HeLa-solujen vahvat kasvun ominaisuudet ja epiteelimorfologian samalla kun ne tarjoavat lisätietoa optisen lukeman muodossa pitkittäistutkimuksia varten.

Lusiferaasia ilmentävä fenotyyppi tekee HeLa-Luc-soluista erityisen hyödyllisiä ksenotransplantaatti- ja metastaasitutkimuksissa immuunipuutteisissa eläinmalleissa, joissa reaaliaikaista bioluminesenssikuvantamista voidaan käyttää kasvaimen kuormituksen ja hoitovasteen seurantaan ajan kuluessa. Solupohjaisissa kokeissa näitä soluja käytetään laajalti suurikapasiteettisessa lääkeaineiden seulonnassa, sytotoksisuustestauksessa, geeninsiirtojärjestelmien arvioinnissa sekä syöpäsolujen signalointia ja apoptoosia koskevissa tutkimuksissa. Vakaa raportointigeenin ilmentyminen tukee myös toistettavaa kvantifiointia yhteiskulttuurijärjestelmissä ja kokeellisissa malleissa, jotka vaativat solujen elinkelpoisuuden tai transkriptioaktiivisuuden dynaamista seurantaa.

Kuten emosoluilla HeLa-soluilla, HeLa-Luc-soluilla on genomin epävakaus ja korkea proliferaatiokyky, jotka ovat tyypillisiä ihmisen papilloomaviruksen tyypin 18 (HPV-18) aiheuttamille kohdunkaulansyöpäsoluille. Koeolosuhteet, lusiferaasivektorin suunnittelu, promootterin valinta ja valintastrategia voivat vaihdella laboratorioiden tai kaupallisten lähteiden välillä, mikä voi vaikuttaa raportointigeenin intensiteettiin ja pitkäaikaiseen ilmentymisen vakauteen. Tutkijoiden tulisi siksi tarkistaa lusiferaasiaktiivisuus, kasvukineettiset ominaisuudet ja fenotyyppinen yhdenmukaisuus omissa viljely- ja määritysolosuhteissaan ennen laajamittaista kokeellista käyttöä.

Kudos
Kohtu, kohdunkaula
Sairaus
Ihmisen papilloomavirukseen liittyvä kohdunkaulan adenokarsinooma

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
Hela-Luc (Cytion-tuotenumero 305664)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_YA88

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Luc2 (tulikärpänen, kodonoptimoitu)
Isoentsyymit
G6PD, A
Viruksille altistuminen
Poliovirus 1, 2, 3, vesicular stomatitis (Indiana), enkefalomyokardiitti, adenovirus 5
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen
Tuotteet
Keratiini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Kylvötiheys
1–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
30,5 vuotta
Etnisyys
Afroamerikkalainen