Pāriet uz saturu
Hela-Luc
Audums
Dzemde, dzemdes kakls
Slimība
Ar cilvēka papilomas vīrusu saistīta endocervikālā adenokarcinoma

Dokumenti

Hela-Luc

Cell line · Preces numurs 305664

HeLa-Luc cells are a bioluminescent derivative of the human HeLa cervical adenocarcinoma cell line that have been engineered to constitutively express a l...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HeLa-Luc šūnas ir cilvēka dzemdes kakla adenokarcinomas šūnu līnijas HeLa bioluminiscējošs atvasinājums, kas ir ģenētiski modificētas, lai pastāvīgi ekspresētu luciferāzes reportergēnu. Pēc luciferīna substrāta ievadīšanas šīs šūnas izstaro kvantificējamu luminiscences signālu, kas tieši korelē ar dzīvotspējīgo šūnu skaitu un metabolisko aktivitāti. Šī īpašība ļauj jutīgi un neinvazīvi uzraudzīt audzēja šūnu proliferāciju, izdzīvošanu un izplatību gan in vitro testos, gan in vivo attēlveidošanas lietojumos. HeLa-Luc šūnas saglabā spēcīgas augšanas īpašības un epitēlija morfoloģiju, kas raksturīga vecāku HeLa šūnām, vienlaikus nodrošinot papildu optisko nolasījumu gareniskai eksperimentālajai analīzei.

Luciferāzi ekspresējošais fenotips padara HeLa-Luc šūnas īpaši noderīgas ksenotransplantātu un metastāžu pētījumiem imūndeficīta dzīvnieku modeļos, kur reāllaika bioluminiscences attēlveidošanu var izmantot, lai laika gaitā izsekotu audzēja slogu un terapeitisko reakciju. Šūnu testos šīs šūnas plaši izmanto augstas caurlaidspējas zāļu skrīningam, citotoksicitātes testēšanai, gēnu piegādes sistēmu novērtēšanai un vēža šūnu signālu pārraides un apoptozes pētījumiem. Stabilā reportera ekspresija atbalsta arī reproducējamu kvantificēšanu kopkultūras sistēmās un eksperimentālajos modeļos, kuros nepieciešama šūnu dzīvotspējas vai transkripcijas aktivitātes dinamiska uzraudzība.

Tāpat kā vecāku HeLa šūnas, HeLa-Luc šūnas izrāda genomisko nestabilitāti un augstu proliferatīvo spēju, kas raksturīga transformētām dzemdes kakla vēža šūnām, kas saistītas ar cilvēka papilomas vīrusu 18. tipa (HPV-18). Eksperimentālie apstākļi, luciferāzes vektora dizains, promotora izvēle un atlases stratēģija var atšķirties starp laboratorijām vai komerciālajiem avotiem, potenciāli ietekmējot reportera intensitāti un ilgtermiņa ekspresijas stabilitāti. Tāpēc pētniekiem pirms plaša mēroga eksperimentālas izmantošanas ir jāpārbauda luciferāzes aktivitāte, augšanas kinētika un fenotipiskā konsekvence savos specifiskajos kultivēšanas un analīzes apstākļos.

Audums
Dzemde, dzemdes kakls
Slimība
Ar cilvēka papilomas vīrusu saistīta endocervikālā adenokarcinoma

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
Hela-Luc (Cytion kataloga numurs 305664)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_YA88

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)
Izoenzīmi
G6PD, A
Jutība pret vīrusiem
Poliovīruss 1, 2, 3, vezikulārais stomatīts (Indiana), encefalomiokardīts, adenovīruss 5
Reversā transkriptāze
Negatīvs
Produkti
Keratīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
30,5 gadi
Etniskā piederība
Afroamerikānis