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Hela 229
Pañuelo de papel
Cérvix
Enfermedad
Adenocarcinoma endocervical relacionado con el virus del papiloma humano
Sinónimos
HeLa-229, HeLa229

Documentos

Hela 229

Cell line · Número de producto 305056

The HeLa 229 cell line is a clonal derivative of the original HeLa cell line, which was the first human cell line to be continuously cultured. HeLa cells ...

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01Información general

Descripción

La línea celular HeLa 229 es un derivado clonal de la línea celular HeLa original, que fue la primera línea celular humana de cultivo continuo. Las células HeLa se derivaron de células de cáncer de cuello de útero extraídas de Henrietta Lacks en 1951. La sublínea HeLa 229 se utiliza en diversas áreas de la investigación biomédica, como la investigación del cáncer, el desarrollo de fármacos y la toxicología, debido a su robusto crecimiento y adaptabilidad en condiciones de laboratorio.

Una de las principales características de la línea celular HeLa 229 es su crecimiento y proliferación agresivos, que reflejan el origen canceroso de las células. Esto la hace especialmente útil para estudios que requieren un alto rendimiento celular y un crecimiento rápido, como el cribado de alto rendimiento para el descubrimiento de fármacos. Las células HeLa 229 también son muy susceptibles a la manipulación genética, lo que permite a los investigadores introducir genes extraños o mutaciones específicas para estudiar sus efectos sobre el comportamiento celular y la patología.

Las células HeLa 229 siguen siendo un modelo crítico en virología, ya que son susceptibles a una amplia variedad de virus. Esta susceptibilidad las convierte en una herramienta excelente para estudiar los ciclos vitales virales, las interacciones huésped-virus y la eficacia de los compuestos antivirales. La línea celular también ha sido decisiva para avanzar en nuestra comprensión de procesos celulares fundamentales, como la replicación del ADN, la transcripción y la apoptosis.

A pesar de su utilidad, el uso de células HeLa, incluida la HeLa 229, plantea consideraciones éticas en relación con el consentimiento y los orígenes de la línea celular, ya que las células se obtuvieron originalmente sin el consentimiento de Henrietta Lacks o su familia. Sin embargo, la investigación en curso con células HeLa sigue contribuyendo significativamente a la ciencia, impulsada por sus características únicas y su importancia histórica en el desarrollo de la biología celular moderna.

Pañuelo de papel
Cérvix
Enfermedad
Adenocarcinoma endocervical relacionado con el virus del papiloma humano
Sinónimos
  • HeLa-229
  • HeLa229

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial
Tiempo de duplicación
26 horas

04Identificadores

Referencia
Hela 229 (número de catálogo de Cytion 305056)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1276

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con 10% de FBS, 1% de NEAA y 1,0 mM de piruvato sódico
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
31 años