ETK-1

ETK-1 yra žmogaus intrahepatinės cholangiokarcinomos (IHCCA) ląstelių linija, iš pradžių išskirta iš suaugusio paciento, sergančio sarkomatoidine cholangiokarcinoma, ascito skysčio. Navikas, iš kurio buvo gauta ETK-1, turėjo tiek tubulinės adenokarcinomos, tiek sarkomatoidinių komponentų, o ląstelių linija atspindi sarkomatoidinį fenotipą. ETK-1 ląstelės auga adhezyviai kaip vienalytis epitelinis monosluoksnis, primenantis akmenukų grindinį, susidedantis daugiausia iš mažų daugiakampių ląstelių su apvaliais arba ovalo formos branduoliais ir ryškiais branduolėliais. Ankstyvųjų pasėlių ląstelės pasižymėjo populiacijos padvigubėjimo trukme, siekiančia maždaug 70 valandų, ir hiperdiploidiniu kariotipu, kurio modalusis chromosomų skaičius buvo apie 75, o tai atitinka agresyviems tulžies takų piktybiniams navikams būdingą chromosominį nestabilumą.

Imunofenotipiškai ETK-1 ląstelės ekspresuoja tulžies takų epitelio žymenis, įskaitant γ-glutamiltranspeptidazę (GGT), citocheratiną 18 (CK18) ir citocheratiną 19 (CK19), patvirtindamos savo cholangiocitinę kilmę. Bazinėmis sąlygomis jos yra neigiamos hepatocitams būdingų žymenų, tokių kaip alfa-fetoproteinas (AFP) ir albuminas, atžvilgiu. ETK-1 ląstelės ekspresuoja vimentiną, o tai atspindi jų sarkomatoidines savybes ir dalinį mezenchiminį fenotipą, tačiau jose neekspresuojamas karcinoembrioninis antigenas (CEA) ir angliavandenių antigenas 19-9 (CA19-9). Šis žymenų profilis atitinka pirminėje navikoje stebimą sarkomatoidinį komponentą ir išryškina bruožus, būdingus epitelio-mezenchiminio perėjimo savybėms.

ETK-1 taip pat buvo naudojama kaip modelis ląstelių plastiškumui ir linijos diferenciacijai cholangiokarcinomoje tirti. Gydymas DNR metiltransferazės inhibitoriumi 5-azacitidinu sukėlė morfologinius ir fenotipinius pokyčius, dėl kurių susiformavo išvestinė ląstelių linija su hepatocitams būdingomis savybėmis, įskaitant AFP, albumino, integrino α1 ir trombopoetino ekspresiją, kartu su tam tikrų tulžies takų žymenų praradimu. Ksenotransplantacijos modeliuose negydytos ETK-1 ląstelės suformuoja navikus, atitinkančius tubulinę adenokarcinomą, pasižyminčią duktaliniu fenotipu. Šie duomenys rodo, kad ETK-1 išlaiko diferenciacijos plastiškumą ir yra vertinga in vitro sistema, skirta tirti tulžies epitelio ląstelių transdiferenciaciją į hepatocitus, epigenetinę reguliaciją ir naviko heterogeniškumą intrahepatinėje cholangiokarcinomoje.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime