Comparing SNU Gastric Lines: SNU-1, SNU-5, SNU-16, and SNU-620

Skrandžio vėžys pasižymi dideliu heterogeniškumu, skiriasi jo histologiniai potipiai, molekuliniai profiliai ir klinikinė elgsena, o tai apsunkina gydymo ir vaistų kūrimo pasirinkimą. Bendrovėje "Cytion" pripažįstame, kad norint veiksmingai modeliuoti šią įvairovę, reikia turėti daugybę ląstelių linijų modelių, atspindinčių skirtingus skrandžio vėžio biologijos aspektus. Skrandžio vėžio ląstelių linijų serija SNU, sukurta iš Korėjos pacientų, apima šį heterogeniškumą ir suteikia svarbius įrankius lyginamiesiems tyrimams. Suprasdami kiekvienos linijos ypatumus, mokslininkai gali pasirinkti optimalius modelius konkretiems tyrimų klausimams spręsti ir kurti veiksmingesnes gydymo strategijas.

Pagrindinės išvados

• SNU skrandžio linijos atspindi įvairius histologinius ir molekulinius skrandžio vėžio potipius
• Įvairių linijų augimo savybės ir morfologija labai skiriasi
• Jautrumo vaistams profiliai skiriasi priklausomai nuo genetinių ir epigenetinių savybių
• Molekuliniai žymenys, įskaitant HER2, E-kadheriną ir MSI statusą, padeda pasirinkti modelį
• Lyginamieji tyrimai su keliomis linijomis pagerina pritaikomąją reikšmę

SNU skrandžio vėžio linijų kilmė ir sukūrimas

Skrandžio vėžio SNU ląstelių linijų serija buvo sukurta Seulo nacionaliniame universitete iš Korėjos pacientų, sergančių skrandžio adenokarcinoma, kuri atspindi įvairias klinikopatologines savybes, pasitaikančias šioje didelio sergamumo populiacijoje. Šios linijos tapo neįkainojamais skrandžio vėžio tyrimų įrankiais visame pasaulyje.

SNU-1 buvo gauta iš paciento, sergančio blogai diferencijuota skrandžio karcinoma, ascitinio skysčio. Ši linija daugiausia auga suspensijoje ir pasižymi agresyviu elgesiu, būdingu pažengusiam skrandžio vėžiui. Dėl prastai diferencijuoto fenotipo ji tinka dediferenciacijos ir atsparumo gydymui tyrimams.

SNU-5 ir SNU-16, panašiai gautos iš ascito, turi būdingų onkogeninių amplifikacijų: SNU-5 - MET, o SNU-16 - FGFR2. Dėl šių genetinių savybių jie ypač vertingi tikslinės terapijos tyrimams, nes yra teigiama kontrolė atliekant jautrumo MET ir FGFR inhibitoriams tyrimus.

SNU-620 yra labiau diferencijuoto skrandžio vėžio fenotipas, pasižymintis adherentiško augimo savybėmis ir išsaugotais epitelio žymenimis. Ši linija leidžia tirti diferencijuoto skrandžio vėžio biologiją ir palyginti ją su agresyvesniais, dediferencijuotais modeliais.

Augimo savybės ir reikalavimai kultūrai

Eksperimentų planavimui ir duomenų interpretavimui labai svarbu suprasti kiekvienos skrandžio vėžio linijos augimo ypatumus. Kultūros sąlygos gali turėti didelę įtaką ląstelių elgsenai, atsakui į vaistus ir molekuliniam fenotipui.

Su suspensijoje augančiomis linijomis, tokiomis kaip SNU-1, SNU-5 ir SNU-16, reikia elgtis kitaip nei su adherentinėmis kultūromis. Šios ląstelės auga kaip plaukiojantys agregatai arba pavienės ląstelės, todėl reikia keisti perėjimo protokolus ir pritaikyti tyrimus. Gyvybingumui vertinti naudojami suspensinėms ląstelėms tinkami metodai, pavyzdžiui, tripano mėlynojo išskyrimas arba srauto citometrija pagrįsti tyrimai.

Padvigubėjimo laikas SNU grupėje labai skiriasi, o tai turi įtakos eksperimentų tvarkaraščiams ir vaistų poveikio protokolams. SNU-16 pasižymi ypač greitu dauginimusi, o SNU-620 - lėtesniu, labiau kontroliuojamu augimu. Į šiuos skirtumus reikėtų atsižvelgti rengiant lyginamuosius jautrumo vaistams tyrimus.

Tyrėjams, ieškantiems gerai apibūdintų adherentinių skrandžio vėžio modelių, mūsų AGS ląstelės (300408 ) yra išsamiai patvirtinta platforma, pasižyminti tvirtomis augimo savybėmis ir gausia publikuota literatūra, pagrindžiančia eksperimentų planavimą.

Molekuliniai ir genetiniai profiliai

SNU skrandžio linijų molekulinės savybės atspindi skrandžio vėžio genetinę įvairovę ir lemia jų tinkamumą konkretiems tyrimams. Šias linijas skiria pagrindiniai onkogeniniai veiksniai, naviką slopinantys veiksniai ir molekuliniai žymenys.

MET amplifikacija SNU-5 lemia konstitucinį receptorių aktyvavimą ir priklausomybę nuo MET signalų, kad išgyventų ir daugintųsi. Ši linija pasižymi dideliu jautrumu MET inhibitoriams, įskaitant crizotinibą ir kapmatinibą, ir yra teigiama kontrolė atliekant į MET nukreiptą vaistų atranką.

FGFR2 amplifikacija SNU-16 linijoje panašiai sukuria onkogeninę priklausomybę, kurią galima išnaudoti FGFR inhibitoriais. Klinikiniai FGFR inhibitorių bandymai su skrandžio vėžiu parodė daug žadančių rezultatų pacientams, kuriems amplifikuotas FGFR2, o SNU-16 leidžia ikiklinikiniu būdu modeliuoti šiuos gydymo metodus.

E-kadherino (CDH1) raiška skiriasi visose SNU grupėse, o jo praradimas siejamas su epitelio-mezenchiminiu perėjimu ir padidėjusiu invaziniu potencialu. SNU-620 išlaiko E-kadherino raišką, atitinkančią jo diferencijuotą epitelinį fenotipą, o silpnai diferencijuotose linijose raiška sumažėja arba jos visai nėra.

Jautrumo vaistams profiliavimas

Lyginant kelių SNU linijų jautrumą vaistams, nustatomi tiek plačiai veikiantys preparatai, tiek junginiai, selektyviai veikiantys specifinius molekulinius potipius. Šia informacija remiamasi nustatant pacientų stratifikavimo strategijas, skirtas individualizuotos medicinos metodams.

Įprastiniai chemoterapiniai vaistai, įskaitant 5-fluorouracilą, cisplatiną ir paklitakselį, pasižymi skirtingu veiksmingumu įvairiose SNU linijose. Jautrumo modeliai dažnai koreliuoja su proliferacijos greičiu, DNR reparacijos gebėjimu ir apoptozės kelio vientisumu. Atliekant didelio našumo atranką visoje grupėje nustatomi junginiai, pasižymintys plačiu priešvėžiniu poveikiu.

Tiksliniai preparatai pasižymi nuspėjamu jautrumu, kuris priklauso nuo onkogeno-vairuotojo statuso. MET inhibitoriai stipriai slopina SNU-5 proliferaciją, o MET-normalių linijų atveju jų aktyvumas yra minimalus. FGFR inhibitoriai selektyviai veikia SNU-16 pagal jos FGFR2 amplifikaciją. Šie aiškūs genotipo ir atsako ryšiai patvirtina tikslinės terapijos paradigmą.

Kombinacijų strategijas galima optimizuoti taikant panelinę atranką. Chemoterapijos ir tikslinių vaistų sinergija gali padėti įveikti atsparumo mechanizmus, o atliekant tyrimus su molekuliniu požiūriu skirtingomis linijomis, galima nustatyti plačiai taikomus derinius, palyginti su deriniais, taikomais tik tam tikriems potipiams.

Ksenograftų ir in vivo modeliai

Perėjimas nuo in vitro kultūrų prie in vivo modelių leidžia įvertinti naviko augimą, metastazes ir vaistų veiksmingumą fiziologiškai tinkamomis sąlygomis. ŠNV linijos skiriasi savo navikiniu aktyvumu ir elgsena in vivo.

Poodiniai ksenograftų modeliai, kuriuose naudojamos SNU linijos imunodeficitinėse pelėse, leidžia įvertinti naviko augimą ir vaistų veiksmingumą. Įvairių linijų navikų įsitvirtinimo greitis ir augimo kinetika skiriasi, o agresyvių, prastai diferencijuotų linijų navikų įsitvirtinimas paprastai būna greitesnis nei diferencijuotų modelių.

Ortotopinė implantacija į skrandžio sienelę geriau atkartoja naviko mikroaplinką ir leidžia ištirti vietinę invaziją bei peritoninį išplitimą. Šis metodas reikalauja chirurginių žinių, tačiau jis suteikia daugiau kliniškai tinkamų modelių pažangiems skrandžio vėžio tyrimams.

Mūsų HGC-27 ląstelės (300436 ) yra papildomas skrandžio karcinomos modelis, pasižymintis nediferencijuotomis savybėmis, tinkamas ksenograftų tyrimams ir lyginamajai analizei su SNU linijomis.

Biomarkerių ir lydinčiųjų diagnostikos priemonių kūrimas

SNU skrandžio vėžio linijos leidžia kurti ir patvirtinti prognozuojamuosius biomarkerius, skirtus gydymui parinkti. Atsaką į vaistus siejant su molekulinėmis savybėmis, nustatomi biologiniai žymenys, kuriuos galima taikyti klinikinėje praktikoje.

HER2 statuso nustatymas naudojant imunohistochemiją (IHC) ir fluorescencinę in situ hibridizaciją (FISH) gali būti patvirtintas ląstelių linijų modeliuose prieš klinikinį taikymą. Ląstelių linijos, kurių HER2 statusas yra žinomas, naudojamos kaip kontroliniai bandymų kūrimo ir kokybės užtikrinimo elementai.

Genų raiškos požymiai, kuriais galima numatyti atsaką į konkrečius gydymo būdus, gali būti išvesti iš ląstelių linijų jautrumo vaistams duomenų ir patvirtinti nepriklausomose kohortose. Kompiuteriniais metodais integruojami daugiominiai duomenys, kad būtų galima nustatyti patikimus prognozuojamus požymius.

Cirkuliuojančių biomarkerių tyrimai, įskaitant cirkuliuojančios naviko DNR (ctDNA) analizę, gali būti kuriami naudojant ląstelių linijų medžiagas. Eksperimentai su žinomais ląstelių linijos DNR kiekiais į plazmos matricas leidžia optimizuoti tyrimo jautrumą ir specifiškumą.

Rekomenduojami produktai skrandžio vėžio tyrimams:

• AGS ląstelės (300408) - gerai apibūdinta skrandžio adenokarcinoma
• HGC-27 ląstelės (300436) - nediferencijuota skrandžio karcinoma
• DMEM su dideliu gliukozės kiekiu (820300a) - Standartinė mitybinė terpė
• Užšaldymo terpė CM-ACF (800650) - Kriokonservavimo tirpalas