Pāriet uz saturu
Capan-2 šūnas
Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
CaPan-2, CAPAN-2, Capan 2, CAPAN 2, Capan2, CAPAN2

Dokumenti

Capan-2 šūnas

Cell line · Preces numurs 300144

Capan-2 šūnu līnija ir cilvēka aizkuņģa dziedzera adenokarcinomas šūnu līnija, kas sākotnēji tika izdalīta no 56 gadus veca kaukāziešu izcelsmes vīrieša aizkuņģa dziedzera audzēja audiem. Tā...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Neliels krājums
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Capan-2 šūnu līnija ir cilvēka aizkuņģa dziedzera adenokarcinomas šūnu līnija, kas pirmo reizi izolēta no 56 gadus veca vīrieša, kas ir baltādains, aizkuņģa dziedzera audzēja audiem. Tā tika iegūta no metastāzes vietas aknās, kas norāda uz tās izcelsmi no sekundāra audzēja, kas padara to īpaši vērtīgu metastātisku procesu un aizkuņģa dziedzera vēža bioloģijas pētījumiem. Šīm šūnām piemīt epitēlija morfoloģija, un tās ir plaši izmantotas aizkuņģa dziedzera vēža, rezistences pret zālēm un audzēju bioloģijas pētījumos.

Ir zināms, ka Capan-2 šūnas ekspresē Kirstena žurkas sarkomas vīrusa onkogēna homologa (KRAS) mutētu formu, kas ir izplatīta mutācija aizkuņģa dziedzera vēža gadījumā, tāpēc tās ir piemērots modelis KRAS izraisītas audzēju ģenēzes pētījumiem. Turklāt tiem ir raksturīga audzēju nomācošā gēna p53 mutāciju ekspresija un ir novērota hromosomu nestabilitāte, kas ir kritiski svarīgas iezīmes, kas ietekmē vēža progresēšanu un atbildes reakciju uz ārstēšanu. Šī šūnu līnija ir izmantota daudzos pētījumos, tostarp ķīmijterapijas efektivitātes novērtēšanā, vēža progresēšanas molekulāro ceļu izpētē un mērķterapijas stratēģiju izstrādē.

Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
  • CaPan-2
  • CAPAN-2
  • Capan 2
  • CAPAN 2
  • Capan2
  • CAPAN2

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Daudzstūris
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm. Veido labi diferencētu adenokarcinomu, kas atbilst aizkuņģa dziedzera karcinomai
Ploidijas statuss
Aneuploīds
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
45 līdz 60 stundas

04Identifikatori

Atsauce
Capan-2 (Cytion kataloga numurs 300144)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0026

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
P53 negatīvs
Antigēna ekspresija
B asinsgrupa, Rh+
Izoenzīmi
Me-2, 2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Fenotipu biežuma produkts: 0.0004
Mutāciju profils
Capan-2 šūnās ir heterozigotiska Kras mutācija kodonā 12: GGT>GTT
Produkti
Mucīns (apomucīns, MUC-1, MUC-2)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glikoze, w: stabils glutamīns, w: 2,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820200a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2 7 dienu laikā veidos konfluentu monoslāni.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
56 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis