Pāriet uz saturu
TK6
Audums
Spleen
Sinonīmi
TK-6, H2BT

Dokumenti

TK6

Cell line · Preces numurs 300357

TK6 is a lymphoblast cell line derived from the spleen of a 5-year-old male diagnosed with hereditary spherocytosis. This cell line is particularly notabl...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

TK6 ir limfoblastu šūnu līnija, kas iegūta no 5 gadus veca vīrieša liesas, kuram diagnosticēta iedzimta sferocitozi. Šī šūnu līnija īpaši izceļas ar to, ka tā ir heterozigotiska attiecībā uz timidīnkināzes (TK) lokusu, kas pamato tās lietderību ģenētiskajos pētījumos. Heterozigotiskums TK lokusā ļauj TK6 šūnām kalpot kā jutīgam modelim mutāciju noteikšanai, nodrošinot stabilu platformu mutagenitātes testēšanai un ģenētiskās toksikoloģijas pētījumiem.

Šūnas tiek plaši izmantotas testos, kas paredzēti, lai kvantitatīvi noteiktu mutācijas trijos lokusos, tostarp rezistenci pret trifluortimidīnu tk lokusā. Šī spēja padara TK6 par nenovērtējamu līdzekli farmācijas un ķīmijas rūpniecībā, lai novērtētu jaunu savienojumu mutagēno potenciālu. Šūnu līnijas unikālais ģenētiskais fons un tās saistība ar slimībām padara to par būtisku resursu pētījumiem, kas vērsti uz mutāciju procesu izpratni un ķīmisko vielu iedarbības citogenētiskās ietekmes novērtēšanu kontrolētā vidē.

Audums
Spleen
Sinonīmi
  • TK-6
  • H2BT

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Limfoblasts

04Identifikatori

Atsauce
TK6 (Cytion kataloga numurs 300357)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0561

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar termiski inaktivētu 10% FBS, 2,5% zirgu seruma
Pārstādīšana
Sāciet kultūras ar šūnu blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet to diapazonā no 1 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml. Subkultivēšanai pārnesiet šūnu suspensiju uz jaunu šūnu kultūras kolbu, kas iepriekš piepildīta ar pareizu tilpumu svaiga kultūras barotnes.
Sēšanas blīvums
1 x 105 šūnas/ml
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
5 gadi