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TK6
Tessuto
Milza
Sinonimi
TK-6, H2BT

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TK6

Cell line · Codice prodotto 300357

TK6 is a lymphoblast cell line derived from the spleen of a 5-year-old male diagnosed with hereditary spherocytosis. This cell line is particularly notabl...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
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01Informazioni generali

Descrizione

TK6 è una linea cellulare di linfoblasto derivata dalla milza di un maschio di 5 anni con diagnosi di sferocitosi ereditaria. Questa linea cellulare si distingue in particolare per essere eterozigote per il locus della timidina chinasi (TK), il che è alla base della sua utilità nella ricerca genetica. L'eterozigosi al locus TK consente alle cellule TK6 di fungere da modello sensibile per l'individuazione di mutazioni in avanti, fornendo una solida piattaforma per i test di mutagenicità e gli studi di tossicologia genetica.

Le cellule sono ampiamente utilizzate in saggi progettati per rilevare quantitativamente le mutazioni in avanti in tre loci, compresa la resistenza alla trifluorotimidina nel locus tk. Questa capacità rende la TK6 uno strumento prezioso per l'industria farmaceutica e chimica per valutare il potenziale mutageno di nuovi composti. Il background genetico unico della linea cellulare e la sua rilevanza per la malattia la rendono una risorsa fondamentale per gli studi incentrati sulla comprensione dei processi di mutazione e sulla valutazione degli effetti citogenetici dell'esposizione a sostanze chimiche in un ambiente controllato.

Tessuto
Milza
Sinonimi
  • TK-6
  • H2BT

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Tipo di cellula
Linfoblasto

04Identificatori

Riferimento bibliografico
TK6 (numero di catalogo Cytion 300357)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0561

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con 10% FBS inattivato al calore, 2,5% siero di cavallo
Subcoltura
Avviare le colture con una densità cellulare di 5 x 105 cellule/ml e mantenerle entro un intervallo compreso tra 1 x 105 e 1 x 106 cellule/ml. Per la subcoltura, trasferire la sospensione cellulare in una nuova fiasca di coltura cellulare pre-riempita con il volume corretto di terreno di coltura fresco.
Densità di semina
1 x 105 cellule/mL
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
5 anni