Ga naar de inhoud
WT51
Weefsel
Perifeer bloed
Synoniemen
WT-51, WT 51, GM03103, GM3103, GM03103A

Documenten

WT51

Cell line · Productnummer 302141

EBV-transformed B-lymphoblastoid cell line, derived from a male person, age unspecified. Homozygous cell line for HLA A:9, ,B:14, DR:4, and DP:2. Consanguine...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Weinig op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving
EBV-getransformeerde B-lymfoblastoïd cellijn, afkomstig van een mannelijk persoon, leeftijd niet gespecificeerd. Homozygote cellijn voor HLA A:9, ,B:14, DR:4, en DP:2. Bloedverwante ouders. WT51 maakte deel uit van het 10e panel van de International Histocompatibility Workshop (10IHW) cellijnen. Ingediend door Dr.M.Trucco, HLA-laboratorium, Pittsburgh University Cancer Institute, VS.
Weefsel
Perifeer bloed
Toepassingen
Functionele analyse en genotypering van HLA klasse II moleculen. Analyse van oppervlakteantigenen van B-cellen, testen van cytotoxische geneesmiddelen, mutatieanalyse, analyse van apoptotische mechanismen
Synoniemen
  • WT-51
  • WT 51
  • GM03103
  • GM3103
  • GM03103A

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Ronde cellen
Celtype
B lymfoblast
Karyotype
46, x,Y

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
WT51 (Cytion catalogusnummer 302141)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_E887

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
CD19+
Virussen
Vrij van humaan pathogene virussen SV40, JC/BK, HBV, HCV en HIV. Bevat EBV.

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Heruitplanten
Homogeniseer de celsuspensie in de kolf voorzichtig door op en neer te pipetteren en neem vervolgens een representatief monster om de celdichtheid per ml te bepalen. Verdun de suspensie tot een celconcentratie van 1 x 105 cellen/ml met vers kweekmedium en verdeel de aangepaste suspensie in nieuwe kolven voor verdere kweek.
Vloeistofverversing
1 tot 2 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Ongespecificeerd
Etnische afkomst
Kaukasisch