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WT51
Gewebe
Peripheres Blut
Synonyme
WT-51, WT 51, GM03103, GM3103, GM03103A

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WT51

Cell line · Artikelnummer 302141

EBV-transformed B-lymphoblastoid cell line, derived from a male person, age unspecified. Homozygous cell line for HLA A:9, ,B:14, DR:4, and DP:2. Consanguine...

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1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung
EBV-transformierte B-Lymphoblastoid-Zelllinie, die von einer männlichen Person, Alter unbestimmt, stammt. Homozygote Zelllinie für HLA A:9, ,B:14, DR:4 und DP:2. Blutsverwandte Eltern. WT51 war Teil des 10th International Histocompatibility Workshop (10IHW) Zelllinienpanels. Eingereicht von Dr. M. Trucco, HLA-Laboratorium, Pittsburgh University Cancer Institute, USA.
Gewebe
Peripheres Blut
Anwendungen
Funktionsanalyse und Genotypisierung von HLA-Klasse-II-Molekülen. Analyse von B-Zell-Oberflächenantigenen, Erprobung von zytotoxischen Medikamenten, Mutationsanalyse, Analyse apoptotischer Mechanismen
Synonyme
  • WT-51
  • WT 51
  • GM03103
  • GM3103
  • GM03103A

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Runde Zellen
Zelltyp
B-Lymphoblasten
Karyotyp
46, x,Y

04Bezeichner

Quellenangabe
WT51 (Cytion-Katalognummer 302141)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_E887

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
CD19+
Viren
Frei von humanpathogenen Viren SV40, JC/BK, HBV, HCV und HIV. Enthält EBV.

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Subkultivierung
Homogenisieren Sie die Zellsuspension im Kolben vorsichtig durch Auf- und Abpipettieren und entnehmen Sie dann eine repräsentative Probe, um die Zelldichte pro ml zu bestimmen. Verdünnen Sie die Suspension mit frischem Kulturmedium auf eine Zellkonzentration von 1 x 105 Zellen/ml und füllen Sie die angepasste Suspension zur weiteren Kultivierung in neue Kolben.
Flüssigkeitswechsel
1 bis 2 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Nicht spezifiziert
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch