Vai al contenuto
WT51
Tessuto
Sangue periferico
Sinonimi
WT-51, WT 51, GM03103, GM3103, GM03103A

Documenti

WT51

Cell line · Codice prodotto 302141

EBV-transformed B-lymphoblastoid cell line, derived from a male person, age unspecified. Homozygous cell line for HLA A:9, ,B:14, DR:4, and DP:2. Consanguine...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Scorte limitate
Lotto
Consigliati (partita più recente)
1

01Informazioni generali

Descrizione
Linea cellulare B-linfoblastoide trasformata da EBV, derivata da una persona di sesso maschile, età non specificata. Linea cellulare omozigote per HLA A:9, ,B:14, DR:4, e DP:2. Genitori consanguinei. WT51 faceva parte del pannello di linee cellulari del 10° International Histocompatibility Workshop (10IHW). Presentato dal Dr. M. Trucco, HLA-Laboratory, Pittsburgh University Cancer Institute, USA.
Tessuto
Sangue periferico
Applicazioni
Analisi funzionale e genotipizzazione delle molecole HLA di classe II. Analisi degli antigeni di superficie delle cellule B, test di farmaci citotossici, analisi mutazionale, analisi dei meccanismi apoptotici
Sinonimi
  • WT-51
  • WT 51
  • GM03103
  • GM3103
  • GM03103A

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Celle rotonde
Tipo di cellula
Linfoblasto B
Cariotipo
46, x,Y

04Identificatori

Riferimento bibliografico
WT51 (numero di catalogo Cytion 302141)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_E887

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
CD19+
Virus
Privo di virus patogeni umani SV40, JC/BK, HBV, HCV e HIV. Contiene EBV.

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Subcoltura
Omogeneizzare delicatamente la sospensione cellulare nel pallone pipettando verso l'alto e verso il basso, quindi prelevare un campione rappresentativo per determinare la densità cellulare per ml. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione cellulare di 1 x 105 cellule/ml con terreno di coltura fresco e aliquotare la sospensione regolata in nuovi palloni per l'ulteriore coltivazione.
Rinnovo dei fluidi
da 1 a 2 volte alla settimana
Scongelamento e coltura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
Non specificato
Etnia
Caucasico