ETK-1

ETK-1 to ludzka linia komórkowa raka dróg żółciowych wewnątrzwątrobowych (IHCCA), pierwotnie wyhodowana z płynu puchlinowego dorosłego pacjenta z rakiem dróg żółciowych o charakterze sarkomatoidalnym. Nowotwór, z którego pochodzi ETK-1, wykazywał zarówno elementy gruczołakokomórkowego raka przewodowego, jak i elementy sarkomatoidalne, a linia komórkowa odzwierciedla fenotyp sarkomatoidalny. Komórki ETK-1 rosną w sposób adhezyjny, tworząc jednolitą monowarstwę nabłonkową o wyglądzie brukowym, złożoną głównie z małych komórek wielokątnych o jądrach okrągłych lub owalnych i wyraźnych jądrach komórkowych. Komórki we wczesnych pasażach wykazywały czas podwojenia populacji wynoszący około 70 godzin oraz kariotyp hiperdiploidalny z modalną liczbą chromosomów w przedziale około 75, co jest zgodne z niestabilnością chromosomową typową dla agresywnych nowotworów złośliwych dróg żółciowych.

Pod względem immunofenotypowym komórki ETK-1 wykazują ekspresję markerów nabłonka dróg żółciowych, w tym γ-glutamylotranspeptydazy (GGT), cytokeratyny 18 (CK18) i cytokeratyny 19 (CK19), co potwierdza ich pochodzenie z komórek cholangioocytów. W warunkach podstawowych wykazują one ujemny wynik w przypadku markerów związanych z hepatocytami, takich jak alfa-fetoproteina (AFP) i albumina. Komórki ETK-1 wykazują ekspresję wimentyny, co odzwierciedla ich cechy sarkomatoidalne i częściowy fenotyp mezenchymalny, przy czym nie wykazują ekspresji antygenu rakowo-płodowego (CEA) ani antygenu węglowodanowego 19-9 (CA19-9). Ten profil markerów odpowiada składnikowi sarkomatoidowemu obserwowanemu w guzie pierwotnym i podkreśla cechy zgodne z właściwościami podobnymi do przejścia nabłonkowo-mezenchymalnego.

Linia ETK-1 została również wykorzystana jako model do badania plastyczności komórkowej i różnicowania linii komórkowej w raku dróg żółciowych. Leczenie inhibitorem metylotransferazy DNA, 5-azacytydyną, wywołało zmiany morfologiczne i fenotypowe, skutkujące powstaniem pochodnej linii komórkowej o cechach podobnych do hepatocytów, w tym ekspresją AFP, albuminy, integryny α1 i trombopoetyny, wraz z utratą niektórych markerów dróg żółciowych. W modelach ksenotransplantacyjnych nieleczone komórki ETK-1 tworzą guzy odpowiadające gruczolakorakowi cewkowatemu o fenotypie przewodowym. Wyniki te wskazują, że linia ETK-1 zachowuje plastyczność różnicowania i stanowi cenny system in vitro do badania transdyferencjacji nabłonka dróg żółciowych w kierunku hepatocytów, regulacji epigenetycznej oraz heterogenności nowotworu w raku dróg żółciowych wewnątrzwątrobowych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym