Hep-64.1

Linia komórek wątrobiaka Hep-64.1 pochodzi z guza wątroby myszy, w szczególności ze szczepu myszy C57BL/6J. Ta linia komórkowa wyróżnia się pochodzeniem hepatocytarnym, potwierdzonym przez analizę białek filamentów pośrednich. Hep-64.1 wyraża proste keratyny K8 i K18, które są typowe dla normalnych komórek wątroby, a także wimentynę i keratynę K19 w różnym stopniu. Te wzorce białkowe potwierdzają hepatocytarną naturę linii komórkowej i jej klasyfikację jako linii hepatoma.

Linia komórkowa Hep-64.1 wykazuje morfologię głównie nabłonkową, odzwierciedlającą jej pochodzenie z hepatocytów. Ten fenotyp morfologiczny jest zgodny z profilem ekspresji białek. Analiza odcisków palców DNA Hep-64.1 nie ujawniła żadnych poważnych nieprawidłowości strukturalnych, co wskazuje na pewien stopień stabilności genomu. Zaobserwowano jednak pewne zmiany we względnej intensywności określonych pasm wraz ze wzrostem liczby pasaży, co sugeruje niewielką zmienność genomu w dłuższych okresach hodowli.

Pomimo braku wykrywalnych mutacji p53 w pierwotnych guzach wątroby myszy, aberracje stwierdzono w niektórych liniach hepatoma podczas rozmnażania in vitro. Linia komórkowa Hep-64.1 została przeanalizowana pod kątem mutacji w genach p53 i c-Ha-ras. Brak wykrywalnych mutacji w genie p53 w tej linii we wczesnych pasażach sugeruje stabilne tło genetyczne. Ta linia komórkowa służy jako cenny model do badania raka wątrobowokomórkowego, zapewniając wgląd w komórkowe i molekularne mechanizmy leżące u podstaw nowotworzenia wątroby.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym