Hep-64.1

Hep-64.1 hepatomas šūnu līnija ir iegūta no peļu aknu audzēja, īpaši no C57BL/6J peļu celma. Šī šūnu līnija izceļas ar hepatocītisku izcelsmi, ko apstiprina starpposma pavedienu proteīnu analīze. Hep-64.1 ekspresē vienkāršos keratīnus K8 un K18, kas raksturīgi normālām aknu šūnām, kā arī vimentīnu un keratīnu K19 dažādās pakāpēs. Šie proteīnu modeļi apstiprina šūnu līnijas hepatocītisko raksturu un tās klasifikāciju kā hepatomas līniju.

Hep-64.1 šūnu līnijai ir pārsvarā epitēlija morfoloģija, kas atspoguļo tās izcelsmi no hepatocītiem. Šis morfoloģiskais fenotips atbilst tās proteīnu ekspresijas profilam. Hep-64.1 DNS pirkstu nospiedumu analīze neatklāja nekādas būtiskas strukturālas anomālijas, kas norāda uz zināmu genoma stabilitāti. Tomēr, palielinoties pasāžu skaitam, tika novērotas dažas izmaiņas konkrētu joslu relatīvajā intensitātē, kas liecina par nelielu genoma mainīgumu ilgāku kultūras periodu laikā.

Neskatoties uz to, ka primārajos peļu aknu audzējos nav konstatējamas p53 mutācijas, dažās hepatomu līnijās in vitro pavairošanas laikā tika konstatētas aberācijas. Hep-64.1 šūnu līnija tika analizēta attiecībā uz mutācijām p53 un c-Ha-ras gēnos. Tas, ka šajā līnijā agrīno pasāžu laikā p53 gēna mutācijas nebija konstatējamas, liecina par stabilu ģenētisko fonu. Šī šūnu līnija kalpo kā vērtīgs modelis hepatocelulārās karcinomas izpētei, sniedzot ieskatu par šūnu un molekulārajiem mehānismiem, kas ir aknu audzēju rašanās pamatā.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu