Hep-64.1
Cell line · Číslo výrobku 400205
The Hep-64.1 hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6Jmouse strain. This cell line is notable for its hepatoc...
Přizpůsobení / Doporučení
- Hep-64.1Cell line€800.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
Hepatomová buněčná linie Hep-64.1 je odvozena z myšího jaterního nádoru, konkrétně z myšího kmene C57BL/6J. Tato buněčná linie se vyznačuje hepatocytárním původem, který byl potvrzen analýzou proteinů intermediárních vláken. Hep-64.1 exprimuje jednoduché keratiny K8 a K18, které jsou typické pro normální jaterní buňky, a také vimentin a keratin K19 v různé míře. Tyto proteinové vzorce potvrzují hepatocytární povahu buněčné linie a její zařazení mezi hepatomové linie.
Buněčná linie Hep-64.1 vykazuje převážně epiteliální morfologii, což odráží její původ z hepatocytů. Tento morfologický fenotyp je v souladu s jejím profilem exprese proteinů. Analýza otisků DNA Hep-64.1 neodhalila žádné významné strukturální abnormality, což svědčí o určité genomické stabilitě. Byly však pozorovány určité změny v relativní intenzitě specifických pásů s rostoucím počtem pasáží, což naznačuje menší genomickou variabilitu během delšího kultivačního období.
Navzdory absenci detekovatelných mutací p53 v primárních myších jaterních nádorech byly v některých hepatomových liniích během množení in vitro zjištěny aberace. Buněčná linie Hep-64.1 byla analyzována na přítomnost mutací v genech p53 a c-Ha-ras. Nepřítomnost detekovatelných mutací v genu p53 u této linie během raných pasáží naznačuje stabilní genetické pozadí. Tato buněčná linie slouží jako cenný model pro studium hepatocelulárního karcinomu a umožňuje nahlédnout do buněčných a molekulárních mechanismů, které jsou základem tumorigeneze jater.
- Tkáň
- Játra
- Nemoc
- Hepatocelulární karcinom
- Synonyma
- HEP-64.1
- 64.1
02Klasifikace
- Organismus
- Myš
- Sex
- Žena
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Epitelu podobné
04Identifikátory
- Citace
- Hep-64.1 (katalogové číslo Cytion 400205)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5770
05Exprese a náchylnost
- Exprese proteinů
- Keratin 8, keratin 18, keratin 19, vimentin
- Mutační profil
- P53 wt
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Obnova tekutin
- Každých 3 až 5 dní
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Plemeno / poddruh
- C57BL/6J
- Věk dárce
- Dospělí
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Prohlášení o vyloučení odpovědnosti
- Naše buňky jsou poskytovány výhradně pro účely laboratorního výzkumu in vitro a nejsou určeny pro klinické nebo diagnostické použití, ani nejsou určeny k podávání lidem nebo použití pro veterinární účely. Uživatelé musí dodržovat všechny platné pokyny a předpisy pro zacházení s těmito buňkami a jejich použití ve výzkumném prostředí.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano
