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HCC1569
Tecido
Peito
Doença
Carcinoma ductal da mama
Sinónimos
HCC-1569, Hamon Cancer Center 1569

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HCC1569

Cell line · Número do produto 305784

A HCC1569 é uma linha celular de cancro da mama humana derivada de um carcinoma ductal primário. Apresenta um fenótipo do tipo basal e é caracterizada como sensível ao estrogénio...

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01Informações gerais

Descrição

A HCC1569 é uma linha celular de cancro da mama humano derivada de um carcinoma ductal primário. Apresenta um fenótipo do tipo basal e é caracterizado como recetor de estrogénio (ER) negativo e HER2 positivo, um subtipo molecular com implicações clínicas e terapêuticas distintas. À semelhança de outros cancros da mama do tipo basal, o HCC1569 não expressa o recetor de ER e de progesterona (PR), mas apresenta amplificação e sobreexpressão do oncogene ERBB2 (HER2), um alvo fundamental para as terapias dirigidas ao HER2. A linha celular apresenta um elevado grau de aneuploidia e alberga múltiplas alterações genómicas relevantes para a biologia do cancro da mama.

A linhagem HCC1569 está incluída em esforços de caraterização genómica em grande escala, como a Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) e estudos relacionados que integram dados mutacionais, de número de cópias, de metilação e de expressão. Estes conjuntos de dados mostraram que o HCC1569 é portador de variantes estruturais e de amplificações do número de cópias consistentes com tumores da mama agressivos, incluindo os que envolvem o HER2. Os exames genómicos funcionais evidenciaram a dependência desta linha celular das vias de sinalização HER2, apoiando a sua utilização na avaliação de terapias orientadas para o HER2 e de mecanismos de resistência.

Além disso, a HCC1569 foi caracterizada quanto ao seu genótipo HLA e perfil de expressão, o que tem implicações para o desenvolvimento de imunoterapia. Está incluído em catálogos de tipagem HLA e previsão de neoantigénios, oferecendo oportunidades para explorar a apresentação de epítopos de células T e o reconhecimento imunitário em contextos de cancro da mama HER2-positivo. Esta anotação imunogenética faz do HCC1569 um recurso valioso não só para o estudo da sinalização oncogénica, mas também para a avaliação das interações tumor-imune e para a conceção de imunoterapias personalizadas.

Tecido
Peito
Doença
Carcinoma ductal da mama
Sinónimos
  • HCC-1569
  • Hamon Cancer Center 1569

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tipo de célula
Célula epitelial
Cariótipo
Poliploide
Tempo de duplicação
45 horas

04Identificadores

Referência
HCC1569 (número de catálogo Cytion 305784)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1255

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
Recetor de estrogénio, negativo; recetor de progesterona, negativo
Expressão do antígeno
Glicoproteína epitelial 2 (EGP2); citoqueratina 19
Oncogenes
Her2/neu+; p53-
Perfil mutacional
Mutações: BRCA2, Simples, p.Asn1100Thr (c.3299A>C), Heterozigótico, BRCA2, Simples, p.Val1862fs*1 (c.5578delA), Heterozigótico, FHIT, Simples, p.Val97Phe (c.289G>T) (651G>T), dbSNP=rs139666727, Heterozigótico, Nota=Linhagem germinativa. Mutação, PTEN, Simples, p.Lys267Argfs*9 (c.800delA) (p.Leu265fs, c.795delA), Heterozigótico, TP53, Simples, p.Glu294Ter (c.880G>T), Heterozigótico

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
70 anos
Etnia
Afro-americano