Skip to content
เซลล์ L-428
Tissue
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองฮอดจ์กิน
Synonyms
L-428, L 428

Documents

เซลล์ L-428

Cell line · Product number 300200

The L428 cell line is a well-established neoplastic cell line derived from the pleural effusion of a female patient diagnosed with Hodgkin's disease of th...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ L428 เป็นเซลล์ไลน์เนื้องอกที่ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวาง ซึ่งได้มาจากน้ำในช่องเยื่อหุ้มปอดของผู้ป่วยหญิงที่ได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นโรคมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดฮอดจ์กินส์ (Hodgkin's disease) ชนิดโนดูลาร์สเคลอโรซิง (nodular sclerosing type) การสร้างเซลล์ไลน์นี้ได้ให้แบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาลักษณะของเซลล์และกลไกทางโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังโรคมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดฮอดจ์กินส์เซลล์ L428 มีลักษณะคล้ายกับเซลล์ Reed-Sternberg (RS) และ Hodgkin (H) ซึ่งเป็นเซลล์ที่เป็นลักษณะเฉพาะของมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิด Hodgkin เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะเฉพาะที่แตกต่างจากเซลล์ B, เซลล์ T และเซลล์เม็ดเลือดชนิดอื่น ๆ ซึ่งทำให้เกิดการถกเถียงอย่างต่อเนื่องเกี่ยวกับต้นกำเนิดของเซลล์ RS และ H อย่างแน่ชัด

เซลล์ไลน์ L428 แสดงลักษณะเฉพาะหลายประการ รวมถึงภาวะโครโมโซมผิดปกติ (aneuploidy) และการมีโครงสร้างและจำนวนโครโมโซมที่ผิดปกติหลายตำแหน่ง ซึ่งเป็นเครื่องหมายที่พบได้ทั่วไปในเนื้องอกชนิดนี้ เซลล์เหล่านี้ขาดอิมมูโนโกลบูลิน (Ig) บนผิวเซลล์หรือในไซโตพลาซึม แม้ว่าจะได้มาจากมะเร็งต่อมน้ำเหลืองก็ตาม ซึ่งบ่งชี้ถึงความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญจากเซลล์ลิมโฟไซต์ปกติการไม่มีแอนติเจนของไวรัสเอปสไตน์-บาร์ (EBV) เช่น EBNA และ VCA ช่วยแยกความแตกต่างของเซลล์ L428 จากเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดฮอดจ์กินส์ที่ตรวจพบ EBV สายพันธุ์อื่น ๆ ได้ชัดเจนยิ่งขึ้น นอกจากนี้ เซลล์เหล่านี้ยังขาดการทำงานของไลโซไซม์ เพอร์ออกซิเดส และคลอโรอะซีเทตเอสเทอเรส ซึ่งยิ่งตอกย้ำความแตกต่างจากเซลล์ไมอีลอยด์ มอนโนไซต์ หรือแมคโครฟาจ

ในแง่ของสัณฐานวิทยา เซลล์ L428 แสดงให้เห็นขนาดที่หลากหลาย ตั้งแต่เซลล์เดี่ยวขนาดเล็กที่มีนิวเคลียสเดียวไปจนถึงเซลล์ขนาดใหญ่ที่มีนิวเคลียสหลายนิวเคลียส โดยบางเซลล์มีการยื่นออกมาเป็นลักษณะคล้ายปุ่มบนเยื่อหุ้มเซลล์ นอกจากนี้ เซลล์เหล่านี้ยังมีลักษณะเด่นคือมีนิวเคลียสขนาดใหญ่ซึ่งมักมีรูปร่างคล้ายไตในเชิงหน้าที่ เซลล์ L428 แสดงแอนติเจนคล้าย Ia และตัวรับ T-cell แต่ไม่มีตัวบ่งชี้ร่วมของลิมโฟไซต์และไมอีลอยด์อื่น ๆ ลักษณะภูมิคุ้มกันเฉพาะนี้ ร่วมกับลักษณะทางโครโมโซมและสัณฐานวิทยา สนับสนุนการจัดจำแนก L428 เป็นแบบจำลองของมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดฮอดจ์กิน โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาชีววิทยาของเซลล์ RS และ H

เซลล์ไลน์ L428 ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยเพื่อศึกษาพยาธิกำเนิดของโรคมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดฮอดจ์กิน และเพื่อตรวจสอบเป้าหมายการรักษาที่เป็นไปได้ ความสามารถในการแบ่งตัวในหลอดทดลองและคุณสมบัติเฉพาะของเซลล์ไลน์นี้ ทำให้เป็นทรัพยากรสำคัญในการพัฒนาความเข้าใจเกี่ยวกับโรคมะเร็งทางโลหิตวิทยาที่ซับซ้อนนี้

Tissue
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองฮอดจ์กิน
Synonyms
  • L-428
  • L 428

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เซลล์กลม
Cell type
ลิมโฟบลาสต์

04Identifiers

Citation
L428 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300200)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1361

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารเสริมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, โซเดียมไพรูเวต 1 มิลลิโมลาร์, NEAA 1%
Subculturing
รักษาวัฒนธรรมโดยการเติมหรือเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเชื้อเป็นระยะๆ เริ่มต้นวัฒนธรรมด้วยความหนาแน่น 5 x 105 เซลล์/มล. และรักษาความเข้มข้นของเซลล์ให้อยู่ในช่วง 3 x 105 ถึง 1 x 106 เซลล์/มล. เพื่อการเจริญเติบโตที่ดีที่สุด
Seeding density
1 x 10⁵ เซลล์/มล.
Fluid renewal
ทุก 3 วัน
Post-thaw recovery
รวดเร็ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
37 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน