Skip to content
C8-D1A
Tissue
สมอง
Synonyms
C8D1A, Astrocyte type I clone

Documents

C8-D1A

Cell line · Product number 300316

The C8-D1A cell line is an astrocyte cell line derived from the cerebral cortex of an 8-day-old C57BL/6 mouse. This cell line is extensively used in neuro...

€500.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ C8-D1A เป็นเซลล์ไลน์แอสโทรไซต์ที่ได้มาจากเยื่อหุ้มสมองของหนู C57BL/6 อายุ 8 วัน เซลล์ไลน์นี้ถูกใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยทางชีววิทยาประสาทเนื่องจากคุณสมบัติของแอสโทรไซต์ที่แข็งแกร่ง ซึ่งทำให้เป็นแบบจำลองตัวแทนสำหรับการศึกษาด้านต่างๆ ของการทำงานของแอสโทรไซต์และปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์ประสาทกับเซลล์เกลียเซลล์ C8-D1A แสดงโปรตีน glial fibrillary acidic protein (GFAP) ซึ่งเป็นโปรตีนเส้นใยขนาดกลางที่เป็นลักษณะเฉพาะของแอสโทรไซต์ที่เจริญเต็มที่ แสดงถึงสถานะที่แตกต่างและสายพันธุ์แอสโทรไซต์ของพวกมัน

งานวิจัยที่ใช้เซลล์ไลน์ C8-D1A ได้มีส่วนสำคัญอย่างยิ่งต่อการทำความเข้าใจการตอบสนองการอักเสบของระบบประสาท การเกิดแผลเป็นของเซลล์เกลีย และบทบาทของเซลล์แอสโตรไซต์ในการควบคุมสารสื่อประสาทและการบำรุงรักษาไซแนปส์ เซลล์เหล่านี้ให้สภาพแวดล้อมในหลอดทดลองที่สม่ำเสมอและควบคุมได้สำหรับการวิเคราะห์เส้นทางโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการเสื่อมของระบบประสาท การบาดเจ็บของระบบประสาทส่วนกลาง และการปกป้องระบบประสาทที่เกิดจากเซลล์แอสโตรไซต์ ความสามารถในการใช้งานในการทดสอบที่เกี่ยวข้องกับการค้นพบยา โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับโรคทางระบบประสาท เน้นย้ำถึงความสำคัญของพวกมันในกระบวนการพัฒนาการรักษา

Tissue
สมอง
Applications
การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติ, ประสาทวิทยาศาสตร์
Synonyms
  • C8D1A
  • Astrocyte type I clone

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เซลล์ประสาท
Cell type
แอสโตรไซต์
Ploidy status
เพซูโดไดพลอยด์

04Identifiers

Citation
C8-D1A (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300316)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_6379

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
C57BL/6
Donor age
8 วัน