Skip to content
HROG33 T0 M1
Tissue
สมอง
Disease
กลิโอบลาสโตมา

Documents

HROG33 T0 M1

Cell line · Product number 300878

HROG33 T0 M1 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult female patient with WHO...

€800.00excl. tax and shipping
Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

HROG33 T0 M1 เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งสมองชนิดกลิโอบลาสโตมาหลายรูปแบบ (GBM) ชนิดปฐมภูมิของมนุษย์ ซึ่งสร้างขึ้นจากเนื้อเยื่อเนื้องอกที่เพิ่งผ่าตัดออกจากผู้ป่วยหญิงวัยผู้ใหญ่ 1 ราย ซึ่งมีเนื้องอกสมองระดับ WHO ชนิดที่ 4 บริเวณขมับซ้าย การกำหนด "T0" หมายถึงเนื้องอกหลักในระยะแรกของการวินิจฉัย และ "M1" หมายถึงโมเดลในหลอดทดลองที่สร้างขึ้นจากตัวอย่างนี้ สายพันธุ์เซลล์ถูกสร้างขึ้นเป็นส่วนหนึ่งของความพยายามอย่างเป็นระบบในการสร้างวัฒนธรรมเซลล์ GBM ที่มีการผ่านผ่านต่ำมากจากทั้งเนื้อเยื่อเนื้องอกสดและเนื้อเยื่อเนื้องอกที่ถูกแช่แข็งด้วยความเย็นอย่างรุนแรง โดยมีเป้าหมายเพื่อรักษาลักษณะทางโมเลกุลและการทำงานเฉพาะของผู้ป่วย

HROG33 T0 M1 แสดงการเจริญเติบโตแบบเกาะติดด้วยลักษณะคล้ายไฟโบรบลาสต์ซึ่งเป็นลักษณะทั่วไปของการเพาะเลี้ยงเซลล์ GBM ชนิดปฐมภูมิ เซลล์ก่อตัวเป็นชั้นเดียวและแสดงความสามารถในการเพิ่มจำนวนอย่างสม่ำเสมอในหลอดทดลอง ในการศึกษาการก่อตั้งแบบเปรียบเทียบ พบว่าวัฒนธรรมคู่ที่สกัดจากเนื้อเยื่อเนื้องอกสดและเนื้อเยื่อที่เก็บรักษาด้วยความเย็นไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในด้านสัณฐานวิทยา, การเจริญเติบโต, หรือความไวต่อยา การวิเคราะห์ลักษณะภูมิคุ้มกันของสายเซลล์ HROG ตัวแทนแสดงให้เห็นถึงการแสดงออกของเครื่องหมายที่เกี่ยวข้องกับสายประสาท ได้แก่ glial fibrillary acidic protein (GFAP), nestin, และ vimentin ซึ่งสอดคล้องกับลักษณะของเนื้องอกชนิด glioma การวิเคราะห์ระดับโมเลกุลที่ดำเนินการในชุด HROG รวมถึงการประเมินการเมทิลเลชันของโปรโมเตอร์ MGMT, การเพิ่มจำนวนของ EGFR, และสถานะการกลายพันธุ์ของ TP53, IDH1/2, KRAS และ BRAF ซึ่งสนับสนุนการคงไว้ซึ่งลักษณะทางพันธุกรรมเฉพาะของเนื้องอกในวัฒนธรรมที่จัดตั้งขึ้นแล้ว

ในเชิงหน้าที่ สายเซลล์ที่มาจาก HROG ได้รับการประเมินความไวต่อยาที่ใช้ในการรักษามาตรฐานและยาที่กำลังศึกษาในการรักษา GBM รวมถึงเทโมโซโลไมด์, BCNU (คาร์มุสทีน), วินคริสทีน และอิมาทินิบ โปรไฟล์การตอบสนองต่อยาของคู่สายเซลล์ที่จับคู่กันแสดงให้เห็นพฤติกรรมทางเภสัชวิทยาที่เสถียรและสามารถทำซ้ำได้หลังจากการแช่แข็งเนื้อเยื่อ ในฐานะที่เป็นแบบจำลอง GBM หลักที่มีการผ่านผ่านต่ำมาก HROG33 T0 M1 ให้ระบบ in vitro ที่มีความเกี่ยวข้องทางคลินิกสำหรับการศึกษาชีววิทยาของเนื้องอกในสมองชนิดกลีโอบลาสโตมา การทำนายการตอบสนองต่อการรักษา และความหลากหลายของเนื้องอกเฉพาะบุคคล ในขณะที่ลดสิ่งประดิษฐ์ที่เกี่ยวข้องกับการปรับตัวของสายพันธุ์เซลล์ในระยะยาว

Tissue
สมอง
Disease
กลิโอบลาสโตมา

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
HROG33 T0 M1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300878)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_4U48

04Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้ 50% basal medium + 40% FBS + 10% DMSO หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

06Donor

Donor age
46 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน