Skip to content
INS-1
Tissue
ตับอ่อน, เกาะเล็ก ๆ ของแลงเกอร์ฮานส์
Disease
อินซูลินโอมาในหนู
Synonyms
INS1

Documents

INS-1

Cell line · Product number 300471

The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ INS-1 ได้มาจากอินซูลินโนมาที่สามารถปลูกถ่ายได้ในหนูซึ่งเกิดจากรังสีเอกซ์ เนื่องจากเซลล์ INS-1 มีอินซูลินในปริมาณสูงและตอบสนองต่อการเปลี่ยนแปลงของระดับกลูโคส จึงมักถูกนำมาใช้ในการศึกษาการทำงานของเซลล์เบต้า การเจริญเติบโตและการแสดงออกของฮอร์โมนขึ้นอยู่กับสารรีดิวซ์ 2-mercaptoethanol

เซลล์ INS-1 มีลักษณะเด่นคือความไม่สม่ำเสมอ ประกอบด้วยเซลล์ที่โตเต็มที่ซึ่งมีอินซูลินเป็นบวก และเซลล์ที่ยังไม่โตเต็มที่ซึ่งมีโปรตีนอินซูลินและกลูคากอนเป็นบวก

เซลล์ INS-1 ที่ได้รับฮอร์โมนสองชนิดมีการแสดงออกของ Nkx6.1 ต่ำกว่าและขาดตัวบ่งชี้ของเซลล์อัลฟา ซึ่งบ่งชี้ว่าเซลล์เหล่านี้ยังไม่เจริญเต็มที่ นอกจากนี้ การกระตุ้นด้วยกลูโคสเรื้อรังยังลดการแสดงออกของยีนและโปรตีนของอินซูลินในเซลล์ INS-1 ดังนั้น ระดับของอินซูลินและเปปไทด์ที่มาจากโปรกลูคากอน เช่น GLP-1, GLP-2 และกลูคากอน จึงลดลง

Tissue
ตับอ่อน, เกาะเล็ก ๆ ของแลงเกอร์ฮานส์
Disease
อินซูลินโอมาในหนู
Synonyms
  • INS1

02Classification

Organism
Rat
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
เซลล์เบต้า

04Identifiers

Citation
INS-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300471)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_0352

05Expression and susceptibility

Products
อินซูลิน, กลูตาไธโอน

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารเสริมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS ที่ทำให้ไม่ทำงานทางชีวภาพด้วยความร้อน 10% ใส่กลูโคส 2.5 กรัม/ลิตร และ HEPES 10 มิลลิโมลาร์
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
รวบรวมเซลล์ที่ลอยในหลอดขนาด 15 มิลลิลิตร และล้างเซลล์ที่ติดผนังอย่างเบามือด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (ใช้ 3-5 มิลลิลิตรสำหรับขวด T25 และ 5-10 มิลลิลิตรสำหรับขวด T75)นำ Accutase (1-2 มล. สำหรับขวด T25, 2.5 มล. สำหรับขวด T75) ใส่ให้ทั่วชั้นเซลล์อย่างทั่วถึง ปล่อยให้เซลล์พักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้นรวมและปั่นเหวี่ยงทั้งเซลล์แขวนลอยและเซลล์ที่เกาะติด หลังจากปั่นเหวี่ยงแล้ว ให้นำเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยอย่างระมัดระวังและถ่ายเซลล์แขวนลอยไปยังขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
NEDH
Donor age
666 วัน