Skip to content
INS-1
Tissue
Tụy, các đảo Langerhans
Disease
U insulin ở chuột
Synonyms
INS1

Documents

INS-1

Cell line · Product number 300471

The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào INS-1 được tạo ra từ một khối u insulinoma có thể cấy ghép do tia X gây ra ở chuột. Vì tế bào INS-1 chứa nồng độ insulin cao và phản ứng với sự thay đổi của mức glucose, chúng thường được sử dụng để nghiên cứu chức năng của tế bào beta. Sự phát triển và biểu hiện hormone phụ thuộc vào chất khử 2-mercaptoethanol.

Tế bào INS-1 nổi bật với tính đa dạng, bao gồm các tế bào trưởng thành dương tính với insulin và các tế bào chưa trưởng thành hai hormone biểu hiện protein insulin và glucagon.

Các tế bào INS-1 hai hormone có biểu hiện Nkx6.1 thấp hơn và thiếu các dấu hiệu của tế bào alpha, cho thấy chúng chưa hoàn toàn trưởng thành. Hơn nữa, kích thích glucose mãn tính làm giảm biểu hiện gen và protein insulin trong các tế bào INS-1. Do đó, mức độ insulin và các peptit được tạo ra từ proglucagon như GLP-1, GLP-2 và glucagon cũng giảm.

Tissue
Tụy, các đảo Langerhans
Disease
U insulin ở chuột
Synonyms
  • INS1

02Classification

Organism
Rat
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
Tế bào beta

04Identifiers

Citation
INS-1 (Số catalog Cytion 300471)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_0352

05Expression and susceptibility

Products
Insulin, glutathione

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường 10% huyết thanh bò đã được khử hoạt tính bằng nhiệt, thêm 2,5 g/L glucose và 10 mM HEPES
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Thu thập các tế bào treo lơ lửng vào ống 15 ml và nhẹ nhàng rửa các tế bào bám dính bằng PBS không chứa canxi và magiê (sử dụng 3-5 ml cho bình T25 và 5-10 ml cho bình T75). Áp dụng Accutase (1-2 ml cho bình T25, 2,5 ml cho bình T75) đảm bảo phủ đều lớp tế bào. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 10 phút. Sau khi ủ, trộn và ly tâm cả tế bào treo lơ lửng và tế bào bám dính. Sau khi ly tâm, nhẹ nhàng hòa tan lại khối tế bào và chuyển hỗn hợp tế bào vào bình mới chứa môi trường tươi.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
NEDH
Donor age
666 ngày