INS-1
Cell line · Product number 300471
The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...
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01General information
- Description
INS-1 細胞系源自大鼠體內經 X 射線誘導而形成的可移植胰島素瘤。由於 INS-1 細胞含有高濃度的胰島素，且會對血糖水平的變化作出反應，因此常被用於研究 β 細胞的功能。其生長與激素表達皆取決於還原劑 2-巰基乙醇。
INS-1 細胞以其異質性著稱，由成熟的胰島素陽性細胞，以及同時表達胰島素和胰高血糖素蛋白的不成熟雙激素細胞所組成。
雙激素型 INS-1 細胞的 Nkx6.1 表達較低，且缺乏 α 細胞標記物，這表明它們尚未完全成熟。 此外，長期葡萄糖刺激會降低 INS-1 細胞中胰島素基因與蛋白質的表達。因此，胰島素以及源自前胰高血糖素的胜肽（如 GLP-1、GLP-2）和胰高血糖素的濃度均會下降。
- Tissue
- 胰臟、朗格漢斯島
- Disease
- 大鼠胰島素瘤
- Synonyms
- INS1
02Classification
- Organism
- Rat
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Cell type
- β細胞
04Identifiers
- Citation
- INS-1（Cytion 型號 300471）
- NCBI TaxID
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0352
05Expression and susceptibility
- Products
- 胰島素、穀胱甘肽
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640，含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺，含 2.0 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820700a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 經熱滅活的胎牛血清 (FBS)，並添加 2.5 g/L 葡萄糖及 10 mM HEPES
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 將懸浮細胞收集至 15 毫升試管中，並用不含鈣和鎂的 PBS 輕柔地洗滌貼壁細胞（T25 培養瓶使用 3-5 毫升，T75 培養瓶使用 5-10 毫升）。 加入 Accutase（T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶使用 2.5 毫升），確保完全覆蓋細胞層。讓細胞於室溫下孵育 10 分鐘。 孵育完成後，將懸浮細胞與貼壁細胞合併並進行離心。離心後，小心地將細胞沉澱重新懸浮，並將細胞懸液轉移至裝有新鮮培養基的新培養瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Breed / subspecies
- NEDH
- Donor age
- 666 天
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes