CFPAC-1

Las células CFPAC-1, derivadas de un hombre de 26 años con fibrosis quística y metástasis hepática de adenocarcinoma ductal, son una línea celular hiperdiploide con características destacadas para la investigación biológica. Su capacidad de crecimiento por adherencia y su potencial tumorigénico en ratones desnudos las convierten en un modelo práctico para estudios oncológicos in vitro. El cariotipo de la línea celular incluye un número modal de 73 cromosomas con varias translocaciones y, lo que es más importante, de dos a tres copias del cromosoma 7, donde se localiza el gen de la fibrosis quística.

Estas células expresan antígenos y genes relacionados con el cáncer, como el CA19-9, el antígeno carcinoembrionario (CEA), el antígeno oncofetal pancreático (POA), el antígeno asociado al adenocarcinoma (ACAA) y las queratinas epiteliales, lo que brinda información sobre la biología del cáncer. En cuanto a la patología de la fibrosis quística, las células CFPAC-1 muestran actividades únicas de transporte de iones. No responden a los agonistas del AMPc, a los estimuladores de la adenilciclasa ni a los inhibidores de la fosfodiesterasa en lo que respecta al flujo de iones cloruro, pero muestran un aumento en la salida de cloruro en respuesta a los ionóforos de calcio.

Las células CFPAC-1 portan la mutación común de la fibrosis quística: la deleción de tres nucleótidos que provoca la ausencia de fenilalanina en la posición 508 del gen CFTR. Morfológicamente, presentan características epiteliales con microvellosidades apicales, uniones estrechas y uniones comunicantes, lo cual es relevante para el estudio de las interacciones del tejido epitelial tanto en el cáncer como en la fibrosis quística.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.