CFPAC-1

As células CFPAC-1, derivadas de um homem de 26 anos com fibrose cística e metástase hepática de adenocarcinoma ductal, constituem uma linhagem celular hiperdiplóide com características notáveis para a pesquisa biológica. Sua capacidade de crescimento por aderência e sua capacidade tumorigênica em camundongos nude as tornam um modelo prático para estudos in vitro sobre o câncer. O cariótipo da linhagem celular inclui um número modal de 73 cromossomos com várias translocações e, mais importante, duas a três cópias do cromossomo 7, onde está localizado o gene da fibrose cística.

Essas células expressam antígenos e genes relacionados ao câncer, como o CA19-9, o antígeno carcinoembrionário (CEA), o antígeno oncofetal pancreático (POA), o antígeno associado ao adenocarcinoma (ACAA) e as queratinas epiteliais, oferecendo insights sobre a biologia do câncer. Em termos da patologia da fibrose cística, as células CFPAC-1 demonstram atividades únicas de transporte iônico. Elas não respondem a agonistas do AMPc, estimuladores da adenilciclase ou inibidores da fosfodiesterase no que diz respeito ao fluxo de íons cloreto, mas apresentam aumento do efluxo de cloreto em resposta a ionóforos de cálcio.

As células CFPAC-1 apresentam a mutação comum da fibrose cística — a deleção de três nucleotídeos, levando à ausência de fenilalanina na posição 508 do gene CFTR. Morfologicamente, elas apresentam características epiteliais com microvilosidades apicais, junções apertadas e junções comunicantes, relevantes para o estudo das interações do tecido epitelial tanto no câncer quanto na fibrose cística.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.