Skip to content
CFPAC-1
Tissue
לבלב
Disease
סיסטיק פיברוזיס, אדנוקרצינומה של צינור הלבלב
Metastatic site
כבד
Synonyms
CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC

Documents

CFPAC-1

Cell line · Product number 305066

CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי CFPAC-1, שמקורם בגבר בן 26 הסובל מסיסטיק פיברוזיס ומגרורות בכבד של אדנוקרצינומה דוקטלית, הם קו תאים היפרדיפלואידי בעל תכונות בולטות למחקר ביולוגי. תכונת הצמיחה ההדבקה שלהם ויכולת הגידול שלהם בעכברים עירומים הופכות אותם למודל מעשי למחקרי סרטן במבחנה. הקריוטיפ של קו התאים כולל מספר מודלי של 73 כרומוזומים עם מספר טרנסלוקציות, וחשוב מכך, שתיים עד שלוש עותקים של כרומוזום 7, שבו נמצא הגן של סיסטיק פיברוזיס.

תאים אלה מבטאים אנטיגנים וגנים הקשורים לסרטן, כגון CA19-9, אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA), אנטיגן אונקופטלי של הלבלב (POA), אנטיגן הקשור לאדנוקרצינומה (ACAA) וקרטינים אפיתלליים, ומספקים תובנות על הביולוגיה של הסרטן. מבחינת הפתולוגיה של סיסטיק פיברוזיס, תאי CFPAC-1 מפגינים פעילות ייחודית של הובלת יונים. הם אינם מגיבים לאגוניסטים של cAMP, ממריצים של אדניל ציקלאז או מעכבי פוספודיאסטרז עבור זרימת יוני כלוריד, אך מפגינים זרימה מוגברת של כלוריד בתגובה ליונופורים של סידן.

תאי CFPAC-1 נושאים את המוטציה הנפוצה בסיסטיק פיברוזיס - מחיקה של שלושה נוקלאוטידים המובילה להיעדר פנילאלנין במיקום 508 בגן CFTR. מבחינה מורפולוגית, הם מציגים מאפיינים אפיתלליים עם מיקרו-וילי אפיקליים, חיבורים הדוקים וחיבורים מרווחים, הרלוונטיים לחקר אינטראקציות של רקמת אפיתל הן בסרטן והן בסיסטיק פיברוזיס.

Tissue
לבלב
Disease
סיסטיק פיברוזיס, אדנוקרצינומה של צינור הלבלב
Metastatic site
כבד
Synonyms
  • CFPac-1
  • CF PAC-1
  • CF-PAC1
  • CF-Pac1
  • CF Pac1
  • CFPAC1
  • CFPac1
  • CFPAC

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל
Tumourigenic
כן

04Identifiers

Citation
CFPAC-1 (מספר קטלוג של Cytion: 305066)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1119

05Expression and susceptibility

Protein expression
אנטיגן קרצינו-עוברי (Cea), 9 ננוגרם/מ"ל, אנטיגן אונקופטלי בלבלב (Poa), 28 ננוגרם/מ"ל, אנטיגן הקשור לאדנוקרצינומה (Acaa), 5000 ננוגרם/מ"ל, אנטיגן Ca 19-9, 12000 יחידות/מ"ל, קרטין אפיתליאלי
Antigen expression
אנטיגן CA19-9, 12000 יחידות/מ"ל, קרטין אפיתל

06Handling and culture

Culture medium
IMDM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 3.024 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820800a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
26 שנים
Ethnicity
אירופאי