
- Tissue
- לבלב
- Disease
- סיסטיק פיברוזיס, אדנוקרצינומה של צינור הלבלב
- Metastatic site
- כבד
- Synonyms
- CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC
Documents
CFPAC-1
Cell line · Product number 305066
CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
תאי CFPAC-1, שמקורם בגבר בן 26 הסובל מסיסטיק פיברוזיס ומגרורות בכבד של אדנוקרצינומה דוקטלית, הם קו תאים היפרדיפלואידי בעל תכונות בולטות למחקר ביולוגי. תכונת הצמיחה ההדבקה שלהם ויכולת הגידול שלהם בעכברים עירומים הופכות אותם למודל מעשי למחקרי סרטן במבחנה. הקריוטיפ של קו התאים כולל מספר מודלי של 73 כרומוזומים עם מספר טרנסלוקציות, וחשוב מכך, שתיים עד שלוש עותקים של כרומוזום 7, שבו נמצא הגן של סיסטיק פיברוזיס.
תאים אלה מבטאים אנטיגנים וגנים הקשורים לסרטן, כגון CA19-9, אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA), אנטיגן אונקופטלי של הלבלב (POA), אנטיגן הקשור לאדנוקרצינומה (ACAA) וקרטינים אפיתלליים, ומספקים תובנות על הביולוגיה של הסרטן. מבחינת הפתולוגיה של סיסטיק פיברוזיס, תאי CFPAC-1 מפגינים פעילות ייחודית של הובלת יונים. הם אינם מגיבים לאגוניסטים של cAMP, ממריצים של אדניל ציקלאז או מעכבי פוספודיאסטרז עבור זרימת יוני כלוריד, אך מפגינים זרימה מוגברת של כלוריד בתגובה ליונופורים של סידן.
תאי CFPAC-1 נושאים את המוטציה הנפוצה בסיסטיק פיברוזיס - מחיקה של שלושה נוקלאוטידים המובילה להיעדר פנילאלנין במיקום 508 בגן CFTR. מבחינה מורפולוגית, הם מציגים מאפיינים אפיתלליים עם מיקרו-וילי אפיקליים, חיבורים הדוקים וחיבורים מרווחים, הרלוונטיים לחקר אינטראקציות של רקמת אפיתל הן בסרטן והן בסיסטיק פיברוזיס.
- Tissue
- לבלב
- Disease
- סיסטיק פיברוזיס, אדנוקרצינומה של צינור הלבלב
- Metastatic site
- כבד
- Synonyms
- CFPac-1
- CF PAC-1
- CF-PAC1
- CF-Pac1
- CF Pac1
- CFPAC1
- CFPac1
- CFPAC
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- אפיתל
- Tumourigenic
- כן
04Identifiers
- Citation
- CFPAC-1 (מספר קטלוג של Cytion: 305066)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1119
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- אנטיגן קרצינו-עוברי (Cea), 9 ננוגרם/מ"ל, אנטיגן אונקופטלי בלבלב (Poa), 28 ננוגרם/מ"ל, אנטיגן הקשור לאדנוקרצינומה (Acaa), 5000 ננוגרם/מ"ל, אנטיגן Ca 19-9, 12000 יחידות/מ"ל, קרטין אפיתליאלי
- Antigen expression
- אנטיגן CA19-9, 12000 יחידות/מ"ל, קרטין אפיתל
06Handling and culture
- Culture medium
- IMDM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 3.024 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820800a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 26 שנים
- Ethnicity
- אירופאי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes