CFPAC-1

Les cellules CFPAC-1, issues d’un homme de 26 ans atteint de fibrose kystique et présentant des métastases hépatiques d’un adénocarcinome canalaire, constituent une lignée cellulaire hyperdiploïde présentant des caractéristiques remarquables pour la recherche biologique. Leur capacité de croissance par adhérence et leur potentiel tumorigène chez la souris nue en font un modèle pratique pour les études in vitro sur le cancer. Le caryotype de cette lignée cellulaire comprend un nombre modal de 73 chromosomes avec plusieurs translocations et, surtout, deux à trois copies du chromosome 7, où se trouve le gène de la fibrose kystique.

Ces cellules expriment des antigènes et des gènes liés au cancer, tels que le CA19-9, l’antigène carcino-embryonnaire (CEA), l’antigène oncofœtal pancréatique (POA), l’antigène associé à l’adénocarcinome (ACAA) et les kératines épithéliales, ce qui permet de mieux comprendre la biologie du cancer. En ce qui concerne la pathologie de la fibrose kystique, les cellules CFPAC-1 présentent des activités de transport ionique uniques. Elles ne réagissent pas aux agonistes de l’AMPc, aux stimulateurs de l’adénylcyclase ni aux inhibiteurs de la phosphodiestérase en ce qui concerne le flux d’ions chlorure, mais présentent un efflux accru de chlorure en réponse aux ionophores calciques.

Les cellules CFPAC-1 portent la mutation courante de la fibrose kystique : la délétion de trois nucléotides entraînant l’absence de phénylalanine à la position 508 du gène CFTR. Sur le plan morphologique, elles présentent des caractéristiques épithéliales, notamment des microvillosités apicales, des jonctions serrées et des jonctions communicantes, ce qui est pertinent pour l’étude des interactions des tissus épithéliaux tant dans le cancer que dans la fibrose kystique.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.