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K562-GFP
Tissue
Derrame pleural
Disease
Leucemia mieloide crónica

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K562-GFP

Cell line · Product number 305948

K-562-GFP cells are a genetically modified variant of the human chronic myelogenous leukemia (CML) cell line K-562, originally derived from the peripheral...

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1

01General information

Description

Las células K-562-GFP son una variante genéticamente modificada de la línea celular K-562 de leucemia mielógena crónica (LMC) humana, derivada originalmente de la sangre periférica de un paciente adulto en crisis blástica. La línea parental K-562 se caracteriza por la presencia del cromosoma Filadelfia, lo que da lugar a la proteína de fusión BCR-ABL con actividad constitutiva de tirosina quinasa, la cual impulsa la proliferación y la supervivencia descontroladas. Las células K-562 presentan características de eritroleucemia y pueden ser inducidas a diferenciarse a lo largo de los linajes eritroide, megacariocítico o monocítico bajo condiciones experimentales específicas, lo que las convierte en un modelo versátil para estudiar la diferenciación hematopoyética y la biología de la leucemia.

La introducción de la proteína fluorescente verde (GFP) en las células K-562 permite visualizar y rastrear en tiempo real el comportamiento de las células leucémicas tanto in vitro como in vivo. Las células K-562-GFP se utilizan ampliamente en ensayos relacionados con la proliferación celular, la migración y la respuesta a fármacos, así como en sistemas de cocultivo para estudiar las interacciones con células estromales o inmunitarias. El marcaje fluorescente facilita aplicaciones como la citometría de flujo, la obtención de imágenes de células vivas y el cribado de alto rendimiento.

Modificación genética: Modificadas de manera estable mediante transducción lentiviral incompetente para la replicación a fin de expresar el reportero de proteína fluorescente verde ZsGreen1; se mantienen como una población policlonal bajo selección con puromicina (1–5 µg/mL). Contención S1/BSL-1.

Tissue
Derrame pleural
Disease
Leucemia mieloide crónica

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo linfoblástico
Cell type
Linfoblasto

04Identifiers

Citation
K562-GFP (número de catálogo de Cytion 305948)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1G55

05Expression and susceptibility

Antigen expression
ZsGreen1 (proteína fluorescente verde)
Mutational profile
Mutación: p.Gln136fs*13, homocigoto

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS
Dissociation reagent
Ninguno
Subculturing
Mantenga los cultivos agregando o reemplazando el medio periódicamente. Inicie los cultivos con una densidad de 5 × 10⁵ células/ml y mantenga la concentración celular dentro del rango de 3 × 10⁵ a 1 × 10⁶ células/ml para lograr un crecimiento óptimo.
Seeding density
De 0,3 a 1 × 10⁶ células/ml
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo con un 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
53 años
Ethnicity
caucásico