K562-GFP
Cell line · Product number 305948
K-562-GFP cells are a genetically modified variant of the human chronic myelogenous leukemia (CML) cell line K-562, originally derived from the peripheral...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
תאי K-562-GFP הם גרסה מהונדסת גנטית של קו התאים K-562 של לוקמיה מיאלואידית כרונית (CML) אנושית, שמקורו בדם ההיקפי של חולה בוגר במצב של משבר בלאסט. קו התאים ההורי K-562 מאופיין בנוכחות כרומוזום פילדלפיה, המביא ליצירת חלבון היתוך BCR-ABL בעל פעילות טירוזין קינאז קבועה, המניע התרבות והישרדות בלתי מבוקרות. תאי K-562 מפגינים מאפיינים של אריתרו-לוקמיה וניתן לגרום להם לעבור התמיינות לאורך שושלות אריתרואידיות, מגקריוציטיות או מונוציטיות בתנאים ניסוייים ספציפיים, מה שהופך אותם למודל רב-תכליתי לחקר ההתמיינות ההמטופויטית וביולוגיה של לוקמיה.
החדרת חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP) לתאי K-562 מאפשרת הדמיה ומעקב בזמן אמת אחר התנהגות תאי הלוקמיה במבחנה ובגוף החי. תאי K-562-GFP נמצאים בשימוש נרחב בבדיקות הנוגעות לשגשוג תאים, נדידה ותגובה לתרופות, וכן במערכות תרבית משותפת לחקר האינטראקציות עם תאי סטרומה או תאי חיסון. הסימון הזוהר מאפשר יישומים כגון ציטומטריית זרימה, הדמיית תאים חיים וסינון בתפוקה גבוהה.
שינוי גנטי: עברו שינוי יציב באמצעות העברה לנטרווירוס שאינו מסוגל לשכפל את עצמו, כדי לבטא את הרפורט של החלבון הזוהר הירוק ZsGreen1; נשמרים כאוכלוסייה פוליקלונלית תחת סלקציה של פו-רומיצין (1–5 µg/mL). רמת אבטחה S1/BSL-1.
- Tissue
- הצטברות נוזלים בחלל הצדר
- Disease
- לוקמיה מיאלואידית כרונית
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי לימפוציט
- Cell type
- לימפוציט
04Identifiers
- Citation
- K562-GFP (מספר קטלוג Cytion 305948)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1G55
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- ZsGreen1 (חלבון פלואורסצנטי ירוק)
- Mutational profile
- מוטציה: p.Gln136fs*13, הומוזיגוטי
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אף אחד
- Subculturing
- שמרו על התרבויות על ידי הוספה או החלפה תקופתית של המצע. התחילו את התרבויות בצפיפות של 5 x 105 תאים/מ"ל ושמרו על ריכוז התאים בטווח של 3 x 105 עד 1 x 106 תאים/מ"ל לצורך צמיחה מיטבית.
- Seeding density
- 0.3 עד 1 × 10⁶ תאים למ"ל
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 53 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
