K562-GFP

Les cellules K-562-GFP constituent une variante génétiquement modifiée de la lignée cellulaire K-562 issue de la leucémie myéloïde chronique (LMC) humaine, dérivée à l’origine du sang périphérique d’un patient adulte en crise blastique. La lignée parentale K-562 se caractérise par la présence du chromosome Philadelphie, ce qui entraîne la formation de la protéine de fusion BCR-ABL dotée d’une activité tyrosine kinase constitutive, responsable d’une prolifération et d’une survie incontrôlées. Les cellules K-562 présentent des caractéristiques d’érythroleucémie et peuvent être amenées à se différencier selon les lignées érythroïde, mégacaryocytaire ou monocytaire dans des conditions expérimentales spécifiques, ce qui en fait un modèle polyvalent pour l’étude de la différenciation hématopoïétique et de la biologie de la leucémie.

L’introduction de la protéine fluorescente verte (GFP) dans les cellules K-562 permet la visualisation et le suivi en temps réel du comportement des cellules leucémiques in vitro et in vivo. Les cellules K-562-GFP sont largement utilisées dans des essais portant sur la prolifération cellulaire, la migration et la réponse aux médicaments, ainsi que dans des systèmes de co-culture pour étudier les interactions avec les cellules stromales ou immunitaires. Le marquage fluorescent facilite des applications telles que la cytométrie en flux, l’imagerie de cellules vivantes et le criblage à haut débit.

Modification génétique : Modifiées de façon stable par transduction lentivirale à réplication incompétente pour exprimer le rapporteur de protéine fluorescente verte ZsGreen1; maintenues sous forme de population polyclonale sous sélection à la puromycine (1 à 5 µg/mL). Niveau de confinement S1/BSL-1.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.