K562-GFP

As células K-562-GFP são uma variante geneticamente modificada da linhagem celular K-562 da leucemia mielóide crônica (LMC) humana, originalmente derivada do sangue periférico de um paciente adulto em crise blástica. A linhagem parental K-562 é caracterizada pela presença do cromossomo Filadélfia, resultando na proteína de fusão BCR-ABL com atividade constitutiva da tirosina quinase, o que impulsiona a proliferação e a sobrevivência descontroladas. As células K-562 apresentam características de eritroleucemia e podem ser induzidas a se diferenciar ao longo das linhagens eritróide, megacariocítica ou monocítica sob condições experimentais específicas, tornando-as um modelo versátil para o estudo da diferenciação hematopoiética e da biologia da leucemia.

A introdução da proteína fluorescente verde (GFP) nas células K-562 permite a visualização e o rastreamento em tempo real do comportamento das células leucêmicas in vitro e in vivo. As células K-562-GFP são amplamente utilizadas em ensaios envolvendo proliferação celular, migração e resposta a medicamentos, bem como em sistemas de cocultura para estudar interações com células estromais ou imunológicas. A marcação fluorescente facilita aplicações como citometria de fluxo, imagem de células vivas e triagem de alto rendimento.

Modificação genética: Modificadas de forma estável por transdução lentiviral incompetente para replicação, a fim de expressar o repórter de proteína fluorescente verde ZsGreen1; mantidas como uma população policlonal sob seleção com puromicina (1–5 µg/mL). Contenção S1/BSL-1.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.