L6565
Cell line · Product number 305189
L6565 cells were derived from pancreatic suspensions of splenocytes from L6565 leukemia mice. The chromosomal count ranged from 38 to 144. Electron micros...
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01General information
- Description
Las células L6565 se obtuvieron a partir de suspensiones pancreáticas de esplenocitos de ratones con leucemia L6565. El recuento cromosómico osciló entre 38 y 144. Las observaciones con microscopio electrónico revelaron que las células clonales L6565 tenían núcleos bien definidos y una gran cantidad de orgánulos y partículas virales de clase A y clase C en el citoplasma. Los oncogenes c-myc y c-fos se sobreexpresaban en estas células. El clon celular L6565 es una línea celular madre de leucemia linfoblástica que contiene un virus de ARN. Ha superado la prueba de detección de micoplasmas en esta biblioteca.
La importancia de la línea celular L6565 radica en que proporciona recursos celulares experimentales estandarizados y el apoyo técnico asociado para la investigación en los campos de las ciencias de la vida y la biotecnología. Estas células pueden ser cruciales para comprender los mecanismos moleculares de la leucemia, en particular el papel de las partículas virales y la expresión de oncogenes en la leucemogénesis. Además, sirven como una herramienta valiosa para la prueba y el desarrollo de medicamentos, lo que permite a los investigadores explorar posibles estrategias terapéuticas para la leucemia y otros trastornos relacionados.
- Tissue
- Sangre periférica
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Adherent and suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Linfoblasto
04Identifiers
- Citation
- L6565 (número de catálogo de Cytion 305189)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_A9NB
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p: 0,5 mM de piruvato de sodio, p: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS, 0,005 mg/mL de insulina, 0,01 mg/mL de transferrina humana, 0,1 mM de etanolamina, 0,1 mM de fosfoetanolamina, 25 nM de selenio, 500 nM de hidrocortisona, 0,005 mM de forskolina y extracto de hipófisis bovina (0,15 mg de proteína por ml)
- Subculturing
- Homogeneice suavemente la suspensión celular en el matraz mediante movimientos de pipeteo de arriba hacia abajo; luego, tome una muestra representativa para determinar la densidad celular por ml. Diluya la suspensión con medio de cultivo fresco hasta alcanzar una concentración celular de 5 × 10⁵ células/ml, y divida la suspensión ajustada en alícuotas que se colocarán en nuevos matraces para continuar con el cultivo.
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
07Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
