Skip to content
L6565
Tissue
เลือดส่วนปลาย

Documents

L6565

Cell line · Product number 305189

L6565 cells were derived from pancreatic suspensions of splenocytes from L6565 leukemia mice. The chromosomal count ranged from 38 to 144. Electron micros...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ L6565 ถูกแยกได้จากสารแขวนลอยของเซลล์ม้ามของหนูที่มีมะเร็งเม็ดเลือดขาวสายพันธุ์ L6565 จำนวนโครโมโซมอยู่ในช่วง 38 ถึง 144 การสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนเผยให้เห็นว่าเซลล์โคลน L6565 มีนิวเคลียสที่ชัดเจนและมีออร์แกเนลล์จำนวนมาก รวมถึงอนุภาคไวรัสประเภท A และประเภท C ในไซโทพลาซึมยีนก่อมะเร็ง c-myc และ c-fos ถูกแสดงออกมากเกินไปในเซลล์เหล่านี้ คลอนเซลล์ L6565 เป็นสายพันธุ์เซลล์ต้นกำเนิดของมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดลิมโฟบลาสติกที่มีไวรัส RNA อยู่ภายใน ซึ่งผ่านการทดสอบการตรวจหาไมโคพลาสมาในห้องสมุดนี้แล้ว

ความสำคัญของเซลล์ไลน์ L6565 อยู่ที่การให้ทรัพยากรเซลล์ทดลองที่มีมาตรฐานและการสนับสนุนทางเทคนิคที่เกี่ยวข้องสำหรับการวิจัยในสาขาวิทยาศาสตร์ชีวภาพและเทคโนโลยีชีวภาพ เซลล์เหล่านี้มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการทำความเข้าใจกลไกระดับโมเลกุลของโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาว โดยเฉพาะบทบาทของอนุภาคไวรัสและการแสดงออกของยีนก่อมะเร็งในกระบวนการเกิดโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาว นอกจากนี้ เซลล์เหล่านี้ยังเป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการทดสอบและพัฒนายา ช่วยให้ผู้วิจัยสามารถสำรวจกลยุทธ์การรักษาที่เป็นไปได้สำหรับโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวและความผิดปกติที่เกี่ยวข้องอื่น ๆ

Tissue
เลือดส่วนปลาย

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลิมโฟบลาสต์

04Identifiers

Citation
L6565 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305189)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_A9NB

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, อินซูลิน 0.005 มก./มล., ทรานส์เฟอร์รินมนุษย์ 0.01 มก./มล., เอทานอลามีน 0.1 มม., ฟอสโฟเอทานอลามีน 0.1 มม., ซีลีเนียม 25 นาโนโมลาร์, ไฮโดรคอร์ติโซน 500 นาโนโมลาร์, ฟอร์สโคลิน 0.005 มม., สารสกัดจากต่อมใต้สมองวัว (โปรตีน 0.15 มก. ต่อ มล.)
Subculturing
ค่อยๆ ทำให้สารแขวนลอยของเซลล์ในขวดมีความเป็นเนื้อเดียวกันโดยใช้ปิเปตดูดขึ้นและลง จากนั้นเก็บตัวอย่างที่เป็นตัวแทนเพื่อวัดความหนาแน่นของเซลล์ต่อมิลลิลิตร เจือจางสารแขวนลอยให้ได้ความเข้มข้นของเซลล์ 5 x 105 เซลล์/มิลลิลิตร ด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อสด และแบ่งสารแขวนลอยที่ปรับแล้วใส่ขวดใหม่สำหรับการเพาะเลี้ยงต่อไป
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า