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L6565
Tissue
Sang périphérique

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L6565

Cell line · Product number 305189

L6565 cells were derived from pancreatic suspensions of splenocytes from L6565 leukemia mice. The chromosomal count ranged from 38 to 144. Electron micros...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

Les cellules L6565 ont été obtenues à partir de suspensions pancréatiques de splénocytes provenant de souris atteintes de leucémie L6565. Le nombre de chromosomes variait de 38 à 144. Des observations au microscope électronique ont révélé que les cellules clonales L6565 présentaient des noyaux bien définis ainsi qu’une abondance d’organites et de particules virales de classe A et de classe C dans le cytoplasme. Les oncogènes c-myc et c-fos étaient surexprimés dans ces cellules. Le clone cellulaire L6565 est une lignée de cellules souches de leucémie lymphoblastique contenant un virus à ARN. Il a passé avec succès le test de détection des mycoplasmes dans cette bibliothèque.

L’importance de la lignée cellulaire L6565 réside dans le fait qu’elle fournit des ressources cellulaires expérimentales normalisées ainsi qu’un soutien technique connexe pour la recherche dans les domaines des sciences de la vie et de la biotechnologie. Ces cellules peuvent s’avérer cruciales pour la compréhension des mécanismes moléculaires de la leucémie, en particulier le rôle des particules virales et de l’expression des oncogènes dans la leucémogenèse. De plus, elles constituent un outil précieux pour l’essai et le développement de médicaments, permettant aux chercheurs d’explorer des stratégies thérapeutiques potentielles pour la leucémie et d’autres troubles connexes.

Tissue
Sang périphérique

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Lymphoblaste

04Identifiers

Citation
L6565 (numéro de catalogue Cytion 305189)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_A9NB

05Handling and culture

Culture medium
DMEM : F12 de Ham (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 10 % de FBS, 0,005 mg/mL d’insuline, 0,01 mg/mL de transferrine humaine, 0,1 mM d’éthanolamine, 0,1 mM de phosphoéthanolamine, 25 nM de sélénium, 500 nM d’hydrocortisone, 0,005 mM de forskoline et un extrait d’hypophyse bovine (0,15 mg de protéines par ml)
Subculturing
Homogénéisez délicatement la suspension cellulaire dans le flacon en pipettant de haut en bas, puis prélevez un échantillon représentatif afin de déterminer la densité cellulaire par ml. Diluez la suspension avec du milieu de culture frais jusqu’à obtenir une concentration cellulaire de 5 × 10⁵ cellules/ml, puis répartissez la suspension ajustée en aliquotes dans de nouveaux flacons en vue de la poursuite de la culture.
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.