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L6565
Tissue
Sangue periférico

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L6565

Cell line · Product number 305189

L6565 cells were derived from pancreatic suspensions of splenocytes from L6565 leukemia mice. The chromosomal count ranged from 38 to 144. Electron micros...

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Recommended (freshest lot)
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1

01General information

Description

As células L6565 foram derivadas de suspensões pancreáticas de esplenócitos de camundongos com leucemia L6565. A contagem cromossômica variou de 38 a 144. Observações ao microscópio eletrônico revelaram que as células clonais L6565 apresentavam núcleos bem definidos e uma abundância de organelas e partículas virais das classes A e C no citoplasma. Os oncogenes c-myc e c-fos estavam superexpressos nessas células. O clone celular L6565 é uma linhagem de células-tronco de leucemia linfoblástica contendo um vírus de RNA. Ele foi aprovado no teste de detecção de micoplasma nesta biblioteca.

A importância da linhagem celular L6565 reside no fornecimento de recursos celulares experimentais padronizados e no suporte técnico associado para pesquisas nas áreas de ciências da vida e biotecnologia. Essas células podem ser cruciais para a compreensão dos mecanismos moleculares da leucemia, particularmente o papel das partículas virais e da expressão de oncogenes na leucemogênese. Além disso, elas servem como uma ferramenta valiosa para testes e desenvolvimento de medicamentos, permitindo que os pesquisadores explorem possíveis estratégias terapêuticas para a leucemia e outras doenças relacionadas.

Tissue
Sangue periférico

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Linfoblasto

04Identifiers

Citation
L6565 (número de catálogo da Cytion 305189)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_A9NB

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Suplementar o meio com 10% de FBS, 0,005 mg/mL de insulina, 0,01 mg/mL de transferrina humana, 0,1 mM de etanolamina, 0,1 mM de fosfoetanolamina, 25 nM de selênio, 500 nM de hidrocortisona, 0,005 mM de forskolina e extrato hipofisário bovino (0,15 mg de proteína por mL)
Subculturing
Homogeneíze suavemente a suspensão celular no frasco por meio de movimentos de pipetagem para cima e para baixo e, em seguida, retire uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão com meio de cultura fresco até atingir uma concentração celular de 5 × 10⁵ células/ml e distribua a suspensão ajustada em alíquotas em novos frascos para continuação do cultivo.
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.