Células DLD-1: aplicaciones y conocimientos sobre las células DLD-1 en la investigación del cáncer colorrectal

DLD-1 es una línea celular de carcinoma colorrectal humano que se utiliza comúnmente en la investigación del cáncer. Es una herramienta valiosa para investigar diversos aspectos del cáncer de colon, incluyendo el desarrollo y la progresión del tumor, los mecanismos moleculares subyacentes y la respuesta a los agentes terapéuticos. Por lo tanto, DLD-1 es fundamental para comprender la enfermedad y desarrollar posibles estrategias de tratamiento.

Características generales y origen de las células DLD-1

Antes de trabajar con una línea celular, lo primero que debe considerar un investigador es su origen y sus atributos generales. Esta sección del artículo ofrece una introducción detallada a la línea celular DLD-1. Abordará las siguientes preguntas frecuentes: ¿Qué son las células DLD-1? ¿Qué es una línea celular cancerosa DLD-1? ¿Cuáles son las mutaciones de la línea celular DLD-1? ¿Cuál es el tamaño de una célula DLD-1? ¿Cuál es la morfología de las células DLD-1?

• La DLD-1, una línea celular de cáncer de colon, se originó en el intestino grueso de un paciente varón de 67 años con adenocarcinoma colorrectal. Fue aislada por D. L. Dexter y sus colegas entre 1977 y 1979. Esta línea celular comparte el mismo origen que las líneas celulares HCT-8, HCT-15 y HRT-18.
• Al igual que los cánceres colorrectales, las células DLD-1 presentan un fenotipo de inestabilidad de microsatélites [1].
• Las mutaciones de DLD-1 incluyen KRAS, P53, BRAF, BRCA1 y BRCA2. Debido al estado de P53 en DLD-1, así como a las mutaciones de BRCA, BRCA2 y KRAS en DLD-1, estas células se consideran ideales para estudios sobre el cáncer.
• Estas células presentan una morfología de tipo epitelial.
• El tamaño de la línea celular DLD-1 es de aproximadamente 15 µm.
• La línea celular de cáncer colorrectal humano DLD-1 posee un cariotipo pseudodiploide. Alrededor del 86 % de las células presentan un número modal de cromosomas de 46. Sin embargo, también puede existir poliploidía en el 17,1 % de la población celular.

Representación en 3D de una colonografía por tomografía computarizada o una tomografía computarizada del intestino grueso que se muestra en la pantalla para el diagnóstico de cáncer de intestino grueso, cáncer de colon y cáncer colorrectal.

Información sobre el cultivo de la línea celular DLD-1

Antes de cultivar cualquier línea celular, debes conocer sus requisitos básicos de cultivo celular. En esta sección se destacan los puntos importantes que debes aprender antes de comenzar a trabajar con la línea celular DLD-1. Esto incluye: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de la DLD-1? ¿Cuál es el medio de cultivo de la DLD-1? ¿Cuál es la densidad de siembra de las células DLD-1? ¿Cómo se cultivan las células DLD-1?

Puntos clave para el cultivo de células DLD-1

Tiempo de duplicación:

El tiempo de duplicación de las células DLD-1 es de aproximadamente 15 horas.

Adherente o en suspensión:

La DLD-1 es una línea celular adherente de cáncer de colon humano. Las células crecen formando monocapas.

Densidad de siembra:

Las células DLD-1 se siembran a una densidad de 1 a 2 x 10^⁴ células/cm². Las células adherentes se lavan con solución salina tamponada con fosfato (PBS) 1x y se incuban con solución de pasaje (Accutase) a temperatura ambiente. Tras una incubación de 8 a 10 minutos, las células desprendidas se agregan al medio de cultivo y se centrifugan. A continuación, el sedimento celular se resuspende cuidadosamente y las células se vierten en nuevos recipientes de cultivo que contienen medio de crecimiento.

Medio de crecimiento:

Para el cultivo de las células DLD-1 se utiliza RPMI 1640 con suplementos del medio, que incluyen 10 % de suero fetal bovino (FBS), 2,1 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃. El medio debe cambiarse de 2 a 3 veces por semana. 

Condiciones de crecimiento:

Los cultivos de DLD-1 se mantienen en una incubadora humidificada a 37 °C con un suministro de 5 % de CO₂.

Almacenamiento: 

Las células DLD-1 se almacenan en la fase de vapor de nitrógeno líquido o en un congelador eléctrico de temperatura ultrabaja (a una temperatura inferior a -150 °C).

Proceso de congelación y medio:

Se pueden utilizar los medios de congelación CM-1 o CM-ACF para congelar las células DLD-1. Siempre se recomienda un proceso de congelación lenta, que permita una disminución gradual de la temperatura de 1 °C, evitando así el choque térmico en las células y protegiendo su viabilidad.

Proceso de descongelación:

Las células congeladas se descongelan en un baño de agua preajustado a una temperatura de 37 °C durante 40 a 60 segundos, hasta que quede un pequeño trozo de hielo. Posteriormente, las células se agregan a un medio fresco y se centrifugan. Este paso es necesario para eliminar los componentes del medio de congelación de las células. Las células recolectadas se resuspenden en un medio de crecimiento y se dispensan en el frasco para su cultivo.

Nivel de bioseguridad:

La línea celular DLD-1 se mantiene en laboratorios de nivel de bioseguridad 1.

Células DLD-1 observadas con un aumento de 10x y 20x, lo que revela su morfología epitelial característica.

Línea celular DLD-1: ventajas y limitaciones

En esta sección del artículo, analizaremos las ventajas y limitaciones de la línea celular DLD-1 de cáncer de colon.

Ventajas

Las principales ventajas de la línea celular DLD-1 son:

Modelo de cáncer colorrectal

Las células DLD-1 presentan mutaciones que se encuentran comúnmente en pacientes con cáncer colorrectal, tales como la mutación DLD-1 KRAS, DLD-1 BRCA y DLD-1 BRCA2. Esta relevancia las convierte en un modelo celular clínicamente adecuado para el estudio de esta enfermedad.

Línea celular tumorigénica

Las células DLD-1 son tumorigénicas. Pueden provocar tumores cuando se inyectan en ratones desnudos. Por lo tanto, los investigadores utilizan estas células para desarrollar modelos tumorales de xenoinjerto que ayudan a investigar la formación, el desarrollo y la progresión de los tumores in vivo.

 

Limitaciones

Las limitaciones asociadas con las células DLD-1 son:

Heterogeneidad

Las poblaciones de células de cáncer de colon DLD-1 presentan heterogeneidad genética y fenotípica. Esto puede influir en la generalizabilidad de los resultados de la investigación.

 

Aplicaciones de investigación de la línea celular DLD-1

La línea celular DLD-1 ofrece una amplia gama de aplicaciones en la investigación del cáncer. En esta sección se analizan algunas de las aplicaciones más destacadas.

• Estudio del cáncer: Las células DLD-1 sirven como un valioso modelo in vitro para comprender los mecanismos moleculares que subyacen al crecimiento, desarrollo y progresión del cáncer colorrectal. Además, se utilizan para estudiar la expresión génica, las vías de señalización y la influencia de mutaciones genéticas específicas en el comportamiento de las células cancerosas. Una investigación realizada en 2022 observó que la cascada de señalización PI3K/Akt/YAP regula la migración y la invasión de la línea celular DLD-1 de cáncer colorrectal [2].
• Desarrollo de medicamentos: Los investigadores emplean la línea celular DLD-1 para probar la eficacia de los medicamentos contra el cáncer y evaluar su potencial para el tratamiento del cáncer de colon. Esto contribuye al desarrollo de medicamentos y a combatir la enfermedad de manera eficiente. Un estudio realizado en 2022 utilizó la línea celular cancerosa DLD-1 y exploró la actividad anticancerígena de las ftalocianinas de silicio, compuestos sintetizados químicamente. Los resultados del estudio sugirieron que estos compuestos son potentes agentes anticancerígenos [3]. Curiosamente, otra investigación descubrió el potencial anticancerígeno de una proteína P8 derivada de probióticos utilizando células DLD-1 [4].

5. Publicaciones de investigación sobre las células DLD-1

En esta sección se destacarán algunas publicaciones interesantes y frecuentemente citadas que tratan sobre la línea celular de carcinoma de colon DLD-1.

El glucósido flavonoide diosmina induce la apoptosis y la detención del ciclo celular en la línea celular DLD-1 de cáncer de colon humano

Esta publicación aparece en la revista *Journal of Biologically Active Products from Nature* (2022). El estudio descubrió que la diosmina, un flavonoide, indujo la muerte celular en las células DLD-1 y también provocó la detención del ciclo celular; por lo tanto, puede ser un agente anticancerígeno potencial.

La bromelina suprime eficazmente el cáncer colorrectal con mutación en el gen Kras al estimular la ferroptosis

Este estudio, publicado en *Animal Cells and Systems* (2018), propuso que la bromelina, una enzima, reprime la mutación KRAS en DLD-1 y ejerce potentes efectos citotóxicos.

El bergapteno induce la detención en la fase G1 y una cascada proapoptótica en células de cáncer colorrectal, en asociación con el eje p53/p21/PTEN

Este artículo de investigación se publicó en 2019 en la revista «Environmental Toxicology». El estudio exploró los efectos antitumorales de un compuesto natural, el bergaptén, utilizando una línea celular colorrectal DLD-1.

Fabricación ecológica de un compuesto de nanocurcumina y nanoóxido de hierro: actividad anticancerígena in vitro mejorada contra las líneas celulares DLD-1

Este estudio, publicado en la revista «Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials» (2023), descubrió que los nanocompuestos de curcumina y óxido de hierro son altamente eficaces contra las células de cáncer colorrectal DLD-1.

La epibrassinolida activa la AKT para desencadenar la autofagia junto con el metabolismo de las poliaminas en las líneas celulares de cáncer de colon SW480 y DLD-1

Este artículo de investigación se publicó en 2020 en el Turkish Journal of Biology. El estudio propuso que un producto natural, la epibrassinolida, al activar la AKT en las células DLD-1, estimula la autofagia relacionada con las poliaminas.

Recursos sobre la línea celular DLD-1: protocolos, videos y más

A continuación se presentan algunos recursos sobre las células DLD-1:

• Transfección de DLD-1: Este tutorial en video es una guía completa sobre el protocolo de transfección in vitro de DLD-1.
• Células DLD-1: Este artículo de investigación describe brevemente los requisitos para el cultivo de células DLD-1, incluidos los medios y las condiciones de cultivo. Además, puede ayudarte a conocer el protocolo de transfección utilizado para las células DLD-1.

Los siguientes enlaces contienen el protocolo para el cultivo de DLD-1, células de cáncer de colon de origen humano.

• Línea celular DLD-1: Este sitio web te brindará información básica sobre la línea celular DLD-1. Te ayudará a conocer diferentes protocolos de cultivo de células DLD-1, incluyendo el subcultivo y el manejo de cultivos criopreservados y en proliferación.

Referencias

1. Gavrilas, L.I., et al., Los genes proapoptóticos como nuevas dianas para tratamientos únicos y combinados con resveratrol y curcumina en el cáncer colorrectal. Food & Function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
2. Takeda, T., et al., La señalización PI3K/Akt/YAP promueve la migración y la invasión de las células de cáncer colorrectal DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
3. Farajzadeh, N., et al., Actividad anticancerígena de nuevas ftalocianinas de silicio contra la línea celular de adenocarcinoma colorrectal (DLD-1). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
4. An, B.C., et al., Funciones anticancerígenas de la proteína P8 derivada de probióticos en la línea celular de cáncer colorrectal DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.