AB2.2

La lignée cellulaire AB2.2 est une lignée de cellules souches embryonnaires (ES) murines largement utilisée, dérivée de la souche de souris 129S7 (également connue sous le nom de 129P2/OlaHsd). Elle a joué un rôle prépondérant dans le ciblage génique et la production de souris transgéniques grâce à sa grande capacité d’expansion in vitro et de manipulation génétique. Les cellules AB2.2 sont pluripotentes, capables de donner naissance à tous les feuillets embryonnaires, et ont joué un rôle déterminant dans la production de chimères compétentes sur le plan germinal. Toutefois, à l’instar de nombreuses lignées de cellules ES maintenues pendant de longues périodes de culture, la lignée AB2.2 est sujette à l’instabilité chromosomique, en particulier à l’aneuploïdie touchant le chromosome 8.

L’analyse cytogénétique de la lignée AB2.2 et de ses sous-lignées a révélé une fréquence élevée d’anomalies chromosomiques, la trisomie 8 mosaïque et pure étant particulièrement courantes. Dans une étude, la lignée AB2.2 présentait un caryotype mosaïque caractérisé par des gains des chromosomes 8 et Y, notamment des configurations telles que 42,XY,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XY. Parmi ses sous-lignées, d’autres anomalies karyotypiques ont été identifiées, telles que des trisomies doubles touchant les chromosomes 8 et 11, ainsi que des chromosomes dérivés complexes résultant de translocations déséquilibrées impliquant le chromosome 8. Ces aberrations structurelles et numériques sont associées à une diminution de l’efficacité de la transmission germinale, et leur présence complique l’interprétation des relations génotype-phénotype chez les animaux chimériques.

Compte tenu de son patrimoine génétique et de sa susceptibilité à l’instabilité chromosomique, la souche AB2.2 demeure un outil puissant en génétique murine, mais elle nécessite un contrôle de qualité rigoureux. Un dépistage karyotypique de routine — comprenant à la fois la coloration G et la technique FISH — est recommandé avant de procéder à l’injection de blastocystes afin de garantir l’intégrité chromosomique nécessaire à une transmission germinale fiable et à des analyses phénotypiques précises.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.