AB2.2

เซลล์ไลน์ AB2.2 เป็นเซลล์ไลน์ต้นกำเนิดตัวอ่อนของหนู (ES) ที่ถูกใช้กันอย่างแพร่หลาย ซึ่งได้มาจากสายพันธุ์หนู 129S7 (หรือที่รู้จักในชื่อ 129P2/OlaHsd) เซลล์ไลน์นี้มีบทบาทสำคัญในการกำหนดเป้าหมายยีนและการสร้างหนูดัดแปลงพันธุกรรม เนื่องจากมีความสามารถในการขยายตัวในหลอดทดลองและการดัดแปลงทางพันธุกรรมได้อย่างมีประสิทธิภาพเซลล์ AB2.2 เป็นเซลล์พหุศักยภาพ สามารถพัฒนาไปเป็นเซลล์ต้นกำเนิดของชั้นต้นกำเนิดทั้งสาม และมีความสำคัญในการผลิตชิเมราที่มีความสามารถในการสืบพันธุ์ อย่างไรก็ตาม เช่นเดียวกับเซลล์ต้นกำเนิดชนิดเอ็มบริโอ (ES) หลายสายพันธุ์ที่ถูกเลี้ยงในระยะเวลานาน AB2.2 มีแนวโน้มที่จะเกิดความไม่เสถียรของโครโมโซม โดยเฉพาะภาวะโครโมโซมผิดปกติ (aneuploidy) ที่เกี่ยวข้องกับโครโมโซมที่ 8

การวิเคราะห์ทางไซโตจีเนติกของ AB2.2 และสายย่อยต่างๆ พบความผิดปกติของโครโมโซมในอัตราที่สูง โดยพบลักษณะโมซาอิกและไตรโซมี 8 แบบบริสุทธิ์ได้บ่อยเป็นพิเศษ ในการศึกษาหนึ่ง AB2.2 แสดงลักษณะโครโมโซมโมซาอิกที่มีการเพิ่มจำนวนโครโมโซม 8 และ Y รวมถึงรูปแบบต่างๆ เช่น 42,XY,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XYในบรรดาสายย่อยของมัน มีการระบุความผิดปกติของโครโมโซมเพิ่มเติม เช่น ไตรโซมีคู่ที่เกี่ยวข้องกับโครโมโซม 8 และ 11 และโครโมโซมอนุพันธ์ที่ซับซ้อนซึ่งเกิดจากการถ่ายทอดที่ไม่สมดุลของโครโมโซม 8 ความผิดปกติทางโครงสร้างและจำนวนเหล่านี้สัมพันธ์กับประสิทธิภาพการถ่ายทอดสายพันธุ์ที่ลดลง และการมีอยู่ของพวกมันทำให้การตีความความสัมพันธ์ระหว่างจีโนไทป์และฟีโนไทป์ในสัตว์ไฮบริดซับซ้อนยิ่งขึ้น

เนื่องจากพื้นฐานทางพันธุกรรมและความไวต่อความไม่เสถียรของโครโมโซม AB2.2 ยังคงเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพในพันธุศาสตร์ของหนู แต่จำเป็นต้องมีการควบคุมคุณภาพอย่างระมัดระวัง การตรวจคัดกรอง karyotype เป็นประจำ ซึ่งรวมถึงการย้อม G-banding และ FISH แนะนำให้ทำก่อนการฉีดเข้าสู่บลาสโทซีส เพื่อให้มั่นใจในความสมบูรณ์ของโครโมโซมที่จำเป็นสำหรับการถ่ายทอดทางสายพันธุ์ที่เชื่อถือได้และการวิเคราะห์ลักษณะทางฟีโนไทป์อย่างแม่นยำ

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.