AB2.2

Buněčná linie AB2.2 je široce používaná linie myších embryonálních kmenových buněk (ES) odvozená z myšího kmene 129S7 (známého také jako 129P2/OlaHsd). Díky své robustní schopnosti expanze in vitro a genetické manipulace hraje významnou roli při cílení genů a tvorbě transgenních myší. Buňky AB2.2 jsou pluripotentní, jsou schopny přispívat do všech zárodečných vrstev a mají zásadní význam pro tvorbu chimér s odpovídající zárodečnou linií. Stejně jako mnoho jiných linií ES buněk udržovaných po delší dobu kultivace je však i AB2.2 náchylná k chromozomální nestabilitě, zejména k aneuploidii chromozomu 8.

Cytogenetická analýza AB2.2 a jejích podlinek odhalila vysokou frekvenci chromozomálních abnormalit, přičemž zvláště časté jsou mozaikové a čisté trizomie 8. V jedné studii AB2.2 vykazoval mozaikový karyotyp zahrnující zisky chromozomů 8 a Y, včetně konfigurací jako 42,XY,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XY. Mezi jejími podliniemi byly identifikovány další karyotypové anomálie, jako jsou dvojité trizomie zahrnující chromozomy 8 a 11 a komplexní derivované chromozomy vzniklé nebalancovanými translokacemi zahrnujícími chromozom 8. Tyto strukturální a numerické aberace jsou spojeny se sníženou účinností zárodečného přenosu a jejich přítomnost komplikuje interpretaci vztahů mezi genotypem a fenotypem u chimérických zvířat.

Vzhledem ke genetickému pozadí a náchylnosti k chromozomální nestabilitě zůstává AB2.2 mocným nástrojem v myší genetice, vyžaduje však pečlivou kontrolu kvality. Rutinní screening karyotypu - včetně G-bandingu i FISH - se doporučuje před zahájením injekce blastocysty, aby byla zajištěna chromozomální integrita nezbytná pro spolehlivý přenos zárodečné linie a přesné fenotypové analýzy.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení